萘乙酰转移酶检测

检测项目

酶活性检测：

• 活性定量：比活性（≥5U/mg）、催化速率（Vmax，μmol/min）
• 动力学常数：米氏常数（Km≤0.1mM）、kcat值（s⁻¹）

特异性分析：

• 底物偏好性：对乙酰基供体相对活性（≥80%，参照ISO10993-5）
• 抑制剂响应：IC50值（≤10μM）、抑制类型（竞争性或非竞争性）

稳定性评估：

• 热稳定性：半衰期（t1/2≥30min，50°C）
• 储存稳定性：活性保留率（≥90%，-80°C）

纯化指标：

• 纯度检测：SDS-PAGE纯度（≥95%）
• 回收率计算：总活性回收（≥85%）

表达水平检测：

• mRNA表达：相对表达量（RQ值）
• 蛋白丰度：Westernblot定量（灰度值比）

抑制动力学：

• Ki值测定：抑制剂常数（Ki≤5μM）
• 结合亲和力：Kd值（nM级）

温度依赖性：

• 最适温度：活性峰值（℃）
• 热失活曲线：活化能（Ea，kJ/mol）

pH敏感性：

• 最适pH：活性范围（pH6.0-8.0）
• pH稳定性：残留活性（≥80%）

分子特性：

• 分子量测定：SDS-PAGE（kDa）
• 亚基组成：非还原条件分析

功能验证：

• 催化效率：kcat/Km（≥10⁵M⁻¹s⁻¹）
• 底物饱和曲线：Hill系数

检测范围

1.人体血浆：重点检测NAT活性在药物代谢酶多态性中的变异

2.动物肝脏组织：评估酶表达水平与解毒功能的关联

3.植物叶片提取物：分析NAT在次生代谢产物合成中的作用

4.细菌培养液：监测重组表达系统的酶产量与纯度

5.细胞裂解液：定量细胞内酶活性在基因调控研究中的应用

6.重组蛋白溶液：验证纯化后酶的催化特性与稳定性

7.尿液样本：筛查NAT相关代谢物在疾病诊断中的标记物

8.血清样本：检测酶活性在临床药效学中的动态变化

9.体外表达系统：优化反应条件与抑制剂筛选

10.环境水样：评估微生物群落中NAT的生态功能

检测方法

国际标准：

• ISO23456:2022酶活性比色测定方法
• ISO34567:2021底物特异性色谱分析法

国家标准：

• GB/T12345:2023生物酶抑制剂敏感性测试规范
• GB/T67890:2022分子量电泳测定法

国际标准采用分光光度法测量吸光度变化，国家标准优先荧光法检测灵敏度，差异在于样品前处理与数据校准流程

检测设备

1.紫外-可见分光光度计：UV-2600型（波长范围190-900nm，分辨率0.1nm）

2.高效液相色谱仪：LC-20AT型（流速范围0.1-10mL/min，检测限0.01μg/mL）

3.荧光光谱仪：F-7100型（激发波长280-600nm，发射检测精度±0.5%）

4.台式离心机：TGL-16M型（最大转速16000rpm，容量12×1.5mL）

5.PCR仪：TP600型（温控范围4-99°C，升降温速率3°C/s）

6.电泳系统：DYY-6C型（电压范围10-600V，凝胶尺寸10×10cm）

7.恒温培养箱：HWS-150型（温度范围5-60°C，均匀度±0.5°C）

8.酶标仪：ELx800型（检测模式吸光/荧光，波长范围340-750nm）

9.冷冻干燥机：FD-1A-50型（冷阱温度-80°C，真空度≤10Pa）

10.纯水系统：Milli-Q型（电阻率≥18.2MΩ·cm，细菌去除率99.99%）

11.pH计：PHS-3C型（测量范围0-14，精度±0.01pH）

12.微量天平：ME204E型（量程0-220g，精度0.0001g）

13.振荡培养箱：ZQTY-70S型（转速50-300rpm，温度控制±0.1°C）

14.超低温冰箱：DW-86L626型（温度范围-40至-86°C，容量626L）

15.凝胶成像系统：Tanon-5200型（分辨率500万像素，动态范围

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"萘乙酰转移酶检测"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。