1. 酶活性定量:测定单位时间内甲基基团转移速率(U/mg),采用放射性标记法或比色法
2. 底物特异性分析:评估对CpG/非CpG序列的催化效率(kcat/Km值)
3. 动力学参数测定:包括Km值(0.5-5 μM)、Vmax(10-100 nmol/min)及最适pH范围(7.4-8.2)
4. 抑制剂筛选:测定IC50值(nM至μM级)及抑制类型(竞争性/非竞争性)
5. 热稳定性测试:通过差示扫描量热法测定Tm值(45-60℃)
1. 生物样本:人/动物血清、组织匀浆液及细胞裂解液
2. 重组蛋白制品:大肠杆菌/昆虫细胞表达系统生产的DNMT1/DNMT3A/DNMT3B
3. 药物候选物:小分子抑制剂/激活剂及其代谢产物
4. 体外诊断试剂:甲基化检测试剂盒核心组分
5. 科研材料:CRISPR基因编辑模型细胞的DNMT表达水平
1. ISO 20186-1:2016 分子体外诊断检验标准预检程序
2. GB/T 34796-2017 核酸甲基化检测通用技术要求
3. ASTM E3066-16 酶活性测定的标准指南
4. ISO/IEC 17025:2017 检测实验室能力通用要求
5. GB/T 27417-2017 合格评定 化学分析方法验证程序
1. Thermo Fisher QuantStudio 5 qPCR仪:用于甲基化特异性PCR扩增
2. Agilent 2100 Bioanalyzer:核酸片段分析系统(分辨率0.1-50 ng/μL)
3. Beckman Coulter DTX880 Multimode Detector:荧光偏振法测酶活性
4. Waters ACQUITY UPLC H-Class系统:亚硫酸氢盐转化产物分离(0.1-5 ppm检出限)
5. Malvern MicroCal PEAQ-DSC:差示扫描量热仪(温度精度±0.1℃)
6. PerkinElmer LabChip GX Touch HT:高通量核酸分析(通量384样/小时)
7. Eppendorf BioSpectrometer kinetic:实时动力学监测(波长范围190-830 nm)
8. Roche LightCycler 480 II:高分辨率熔解曲线分析(温度梯度0.01℃/s)
9. Illumina NovaSeq 6000:全基因组甲基化测序(通量6 Tb/run)
10. Shimadzu LCMS-8060NX:超高效液相色谱-质谱联用系统(质量精度1 ppm)
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。
以上是与DNA甲基转移酶检测相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。