检测项目

1. 酶活性测定：催化反应速率（U/mg），底物转化率≥95%，反应条件37℃/pH7.4

2. 蛋白纯度分析：SDS-PAGE电泳纯度≥98%，HPLC色谱峰面积积分偏差≤0.5%

3. 比活性测定：单位蛋白质量催化能力（U/mg），参考范围150-200 U/mg

4. 热稳定性测试：50℃处理30min后残余活性≥80%

5. 抑制剂敏感性：IC50值测定（如ATP竞争性抑制剂），浓度梯度0.1-100μM

6. 金属离子依赖性：Mg²⁺/Mn²⁺浓度优化（1-10mM梯度测试）

检测范围

1. 重组蛋白制剂：大肠杆菌/酵母表达系统生产的PEPK原料药

2. 细胞裂解液：哺乳动物细胞培养样本中的内源性PEPK含量

3. 诊断试剂盒：基于PEPK催化的临床检验试剂核心组分

4. 食品添加剂：发酵制品中残留PEPK活性检测

5. 工业酶制剂：生物催化工艺用PEPK粗品与精制品

6. 科研级酶产品：突变体酶动力学特性表征

检测方法

1. ISO 9001:2015 质量管理体系——酶活性测定通用要求

2. GB/T 34800-2017 蛋白质纯度测定高效液相色谱法

3. ASTM E2310-04(2020) 酶热稳定性测试标准指南

4. ISO 20633:2015 生物技术产品中残留宿主蛋白测定

5. GB/T 35809-2018 酶制剂活力测定通用方法

6. JP XVII 日本药典通则——酶比活性计算方法

检测设备

1. Thermo Scientific Multiskan SkyHigh酶标仪（型号51119700）：紫外/可见光全波长扫描（340nm PEPK特征波长）

2. Agilent 1260 Infinity II HPLC系统（G7117B）：C18反相色谱柱分离纯度分析

3. Malvern Zetasizer Nano ZSP（ZEN5600）：动态光散射法测定酶聚合状态

4. PerkinElmer Lambda 365 UV-Vis分光光度计：连续速率法测定催化活性

5. Eppendorf Mastercycler X50 PCR仪（6335000017）：温度梯度法研究热稳定性

6. Waters ACQUITY UPLC H-Class系统（QSM2000）：超高效液相色谱进行微量杂质分析

7. Beckman Coulter ProteomeLab PA800（A78746）：毛细管电泳法测定等电点

8. Mettler Toledo TGA/DSC3+热分析仪（30070043）：差示扫描量热法研究构象稳定性

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

　　以上是与磷酸烯醇丙酮酸激酶检测相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。