1. 酶活性测定:NAD+还原速率(340 nm吸光度变化率),反应体系温度37±0.5℃,pH 8.8±0.1
2. 比活力计算:单位蛋白浓度下的催化效率(U/mg),采用Lowry法测定蛋白含量
3. Km值测定:乙醛底物浓度梯度0.05-5 mM,非线性回归拟合米氏方程
4. 热稳定性评估:40-60℃预孵育10-60分钟,残余活性≥80%判定为合格
5. 抑制剂效应分析:双硫仑浓度0.1-100 μM的IC50值测定
1. 人体生物样本:全血、肝组织匀浆液、口腔黏膜细胞提取物
2. 酒精饮料:啤酒(乙醇含量≤15%)、蒸馏酒(乙醇含量40-60%)
3. 药品原料:解酒片剂(含ALDH活性成分≥200 U/g)
4. 工业酶制剂:重组ALDH冻干粉(纯度≥95%,比活力≥50 U/mg)
5. 食品添加剂:乙醛清除剂(ALDH负载量≥5 mg/g载体)
1. ASTM E2694-21《分光光度法测定脱氢酶活性标准试验方法》
2. ISO 15193:2009《体外诊断医疗器械-生物源性样品中量的测量-酶催化浓度测量参考方法》
3. GB/T 35809-2018《工业酶制剂活力测定通用方法》
4. GB 5009.277-2016《食品安全国家标准 食品中脱氢酶活性的测定》
5. JIS K 3702:2020《食品添加剂中特定酶活性试验方法》
1. UV-1800紫外可见分光光度计(岛津):波长范围190-1100 nm,带宽1 nm,用于NAD+还原动力学监测
2. RF-6000荧光分光光度计(岛津):激发波长340 nm/发射波长460 nm,检测NADH生成量
3. Agilent 1260 Infinity II高效液相色谱仪:C18色谱柱(4.6×150 mm),流速1 mL/min,定量分析反应产物乙酸
4. Multiskan SkyHigh酶标仪(赛默飞):96孔板读数模式,温度控制精度±0.3℃,高通量筛选应用
5. DSC 214差示扫描量热仪(耐驰):升温速率1℃/min,评估酶热变性温度(Tm值)
6. AKTA pure 25蛋白纯化系统(Cytiva):HisTrap HP柱层析分离重组ALDH同工酶
7. Malvern Zetasizer Nano ZS动态光散射仪:测定酶分子粒径分布(0.3 nm-10 μm)
8. Biacore T200分子互作仪(GE):实时监测ALDH与抑制剂结合动力学(KD值测定)
9. Cryo-TEM Talos F200C冷冻透射电镜(赛默飞):分辨率0.12 nm,观察酶四级结构完整性
10. QTRAP 6500+液质联用仪(SCIEX):MRM模式定量分析ALDH特征肽段(LOD≤1 fmol)
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。
以上是与乙醛脱氢酶检测相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。