检测项目

1. 酶活性测定：比活性（U/mg）、底物转化率（μmol/min）、线性反应区间（pH 6.8-7.4）

2. 抑制剂筛选：半数抑制浓度（IC₅₀）、结合常数（K_i）、选择性指数（SI）

3. 动力学参数分析：米氏常数（K_m）、最大反应速率（V_max）、催化效率（k_cat/K_m）

4. 热稳定性测试：熔解温度（T_m）、变性焓（ΔH）、半衰期（t_1/2）

5. 纯度鉴定：SDS-PAGE纯度（≥95%）、内毒素含量（≤0.1 EU/μg）、宿主蛋白残留量（≤1 ng/mg）

检测范围

1. 重组表达蛋白：大肠杆菌/昆虫细胞/哺乳动物细胞表达的DHODH重组蛋白

2. 细胞培养样本：肿瘤细胞系/原代肝细胞的胞内酶提取液

3. 临床样本：类风湿关节炎患者外周血单核细胞裂解液

4. 药物化合物库：小分子抑制剂/前药代谢产物的体外筛选体系

5. 体外诊断试剂盒：基于DHODH活性的自身免疫疾病检测试剂核心组分

检测方法

1. ASTM E2520-21：分光光度法测定脱氢酶活性标准规程

2. ISO 10993-22:2017：生物材料体外细胞毒性测试的酶抑制试验

3. GB/T 34799-2017：蛋白质热稳定性差示扫描量热法测定通则

4. GB/T 41703-2022：重组蛋白制品宿主残留DNA定量检测方法

5. USP〈1032〉：生物制品的定性与定量生物学活性测定指导原则

检测设备

1. Tecan Infinite M200 Pro多功能酶标仪：紫外/可见光全波长吸光度检测

2. Agilent 1260 Infinity II高效液相色谱系统：蛋白纯度分析与分子量测定

3. Malvern MicroCal PEAQ-DSC微量热仪：热力学参数精密测量（±0.1℃温控精度）

4. Thermo Scientific Q Exactive Hybrid Quadrupole-Orbitrap质谱仪：抑制剂代谢产物鉴定

5. Beckman Coulter Optima XPN-100超速离心机：细胞组分分离（最大转速100,000 rpm）

6. Bio-Rad ChemiDoc MP成像系统：SDS-PAGE凝胶电泳定量分析

7. PerkinElmer Lambda 365紫外分光光度计：连续波长扫描（190-1100 nm）

8. Eppendorf Mastercycler X50实时荧光定量PCR仪：基因表达水平关联分析

9. Sartorius Cubis II MSA225P-100CE微量天平：精密称量（0.01 mg分辨率）

10. Thermo Scientific NanoDrop One超微量分光光度计：蛋白浓度快速测定（0.5-15 mg/mL）