1. 酶活性测定:底物Z-Arg-Arg-AMC水解速率(λex=380nm/λem=460nm),单位U/mg
2. 蛋白浓度检测:BCA法(562nm吸光度),灵敏度0.5-20μg/mL
3. 抑制剂IC50值:梯度浓度测试(10^-9-10^-3M),计算半数抑制浓度
4. 热稳定性分析:25-60℃温控孵育(±0.1℃),监测活性衰减曲线
5. 亚细胞定位验证:免疫荧光染色(抗Cathepsin B抗体1:200稀释)
1. 哺乳动物组织匀浆液(肝/脾/肿瘤样本)
2. 细胞培养上清液及裂解物(HepG2/RAW264.7等细胞系)
3. 重组蛋白制剂(纯度≥95%,载体为PBS/pH6.0缓冲液)
4. 临床血清/血浆样本(EDTA抗凝血离心3000×g 10min)
5. 药物缓释材料(PLGA纳米粒载药系统)
1. ISO 15193:2009 体外诊断医疗器械-酶活性测量要求
2. ASTM E2935-17 酶动力学参数测定标准指南
3. GB/T 34800-2017 蛋白质检测试剂盒通用技术要求
4. GB/T 37864-2019 生物样品中蛋白质类标志物LC-MS/MS定量方法
5. USP<1052> 生物技术衍生品分析方法验证
1. Thermo Scientific Multiskan SkyHigh酶标仪:波长范围200-1000nm,支持动力学模式
2. Agilent 1260 Infinity II HPLC:配备ZORBAX SB-C18柱(4.6×150mm,5μm)
3. Beckman Coulter CytoFLEX流式细胞仪:配置488nm/638nm双激光器
4. Malvern Zetasizer Nano ZSP:动态光散射粒径分析(0.3nm-10μm)
5. Waters Xevo TQ-S微升流质谱仪:MRM模式定量下限0.1pg/mL
6. Leica TCS SP8共聚焦显微镜:STED超分辨模式(分辨率<50nm)
7. Eppendorf Mastercycler X50 PCR仪:温控精度±0.1℃(4-99℃)
8. Mettler Toledo SevenExcellence pH计:测量精度±0.001pH单位
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。
以上是与组织蛋白酶B相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。