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脱氧核糖核酸酶I

  • 原创官网
  • 2025-06-09 15:04:43
  • 关键字:北检研究院,脱氧核糖核酸酶I

相关:

概述:脱氧核糖核酸酶I(DNaseI)是一种内切核酸酶,催化DNA磷酸二酯键水解生成寡核苷酸。核心检测对象包括酶活性、纯度、特异性及稳定性。关键项目涵盖活性单位测定(KU/mg)、比活性分析、杂质残留检测(如宿主蛋白≤0.1%)、金属离子依赖性验证(Ca²⁺/Mg²⁺激活)。采用分光光度法、色谱技术评估其在分子生物学试剂、医药制剂中的质量一致性,确保符合生物安全及功能规范。

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注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

因篇幅原因,CMA/CNAS证书以及未列出的项目/样品,请咨询在线工程师。

☌ 询价

检测项目

酶活性检测:

  • 比活性测试:活性单位(KU/mg),特异性水解线性DNA(参照USP<1042>)
  • 动力学参数:Km值(≤0.5mM),Vmax测定(≥200U/min)
  • pH依赖性:最适pH范围(7.0-8.0),偏差±0.2
纯度分析:
  • SDS-PAGE纯度:单带率≥95%(分子量34kDa±2kDa)
  • 宿主蛋白残留:ELISA检测限≤10ng/mg
  • 核酸残留:荧光法测定(DNA≤1μg/mg)
特异性测试:
  • 底物特异性:DNA水解率≥99%,RNA水解率≤1%
  • 抑制剂敏感性:EDTA抑制效果(IC50≤1mM)
  • 金属离子激活:Ca²⁺依赖性(激活阈值≥0.5mM)
稳定性评估:
  • 热稳定性:37℃半衰期≥24h
  • 冻融稳定性:反复冻融3次活性损失≤5%
  • 储存稳定性:-20℃活性保持率≥95%(12个月)
微生物控制:
  • 细菌内毒素检测:LAL法(≤0.1EU/mg)
  • 生物负载测试:总需氧菌计数≤10CFU/mL
  • 无菌验证:膜过滤法(无生长)
物理化学性质:
  • 等电点测定:pI值(4.5-5.0)
  • 紫外吸收谱:A280/A260比值≥1.8
  • 溶解度测试:≥50mg/mL(缓冲液)
功能性验证:
  • DNA消化效率:琼脂糖凝胶电泳(片段≤100bp)
  • 细胞毒性测试:MTT法(存活率≥90%)
  • 批次一致性:RSD≤5%(n=3)
残留杂质检测:
  • 有机溶剂残留:GC法(甲醇≤500ppm)
  • 重金属检测:ICP-MS(铅≤10ppb)
  • 内毒素控制:显色法(参照EP2.6.14)
包装完整性:
  • 密封性测试:染料渗透法(无泄漏)
  • 容器兼容性:玻璃/塑料浸出物分析(≤0.01%)
  • 标签耐久性:摩擦试验(≥500次)
环境适应性:
  • 温度敏感性:4-25℃活性变化±10%
  • 湿度影响:RH60%储存稳定性≥6个月
  • 光照稳定性:UV暴露活性损失≤2%

检测范围

1.重组DNaseI蛋白制品:涵盖大肠杆菌或酵母表达系统,重点检测宿主蛋白残留及酶活性一致性。

2.诊断试剂盒酶组分:用于PCR或测序前处理,侧重特异性验证及批次间稳定性。

3.吸入用药物制剂:如囊性纤维化治疗药物,检测微生物负载、内毒素及吸入兼容性。

4.实验室级酶制剂:分子生物学应用,重点评估DNA消化效率及杂质控制。

5.工业级DNaseI:食品或造纸工业用,检测热稳定性及重金属残留。

6.细胞培养添加剂:用于减少DNA黏附,验证无菌性及细胞毒性。

7.基因治疗载体组分:辅助病毒清除,侧重活性单位精确度及残留核酸。

8.生物传感器集成酶:实时监测应用,检测响应时间≤30s及pH依赖性。

9.冻干粉末制剂:长期储存型,重点分析复溶活性损失≤5%及水分含量≤3%。

10.微载体固定化酶:用于连续流反应器,评估载体结合率≥90%及操作半衰期。

检测方法

国际标准:

  • USP<1042>生物技术衍生产品活性测定
  • ISO21571:2013核酸酶特异性分析方法
  • EP2.6.14内毒素测试规范
  • ICHQ6B生物制品纯度指南(差异:USP侧重单位定义,EP强调过程控制)
国家标准:
  • ChP2020三部生物制品通则(酶活性测定)
  • GB/T35809-2018蛋白质纯度检测方法
  • GB/T5750-2023生活饮用水微生物检验(差异:GB/T采用简化步骤,ISO要求多批次验证)

检测设备

1.紫外-可见分光光度计:双光束模型(波长范围190-900nm,分辨率0.1nm)

2.高效液相色谱系统:反相HPLC配置(C18柱,流速0.5-2mL/min,检测限1ng)

3.酶标仪:多功能微板读取器(波长范围200-1000nm,精度±2%)

4.质谱仪:MALDI-TOF模型(质量范围500-500,000Da,分辨率5000)

5.电泳系统:SDS-PAGE装置(电压范围50-300V,凝胶浓度8-15%)

6.恒温振荡培养箱:台式模型(温度范围4-60℃,精度±0.5℃)

7.冷冻干燥机:实验室级(冷凝温度-80℃,真空度≤10Pa)

8.生物安全柜:ClassII型(气流速度0.4m/s,HEPA过滤效率99.99%)

9.荧光显微镜:倒置模型(激发波长300-700nm,放大倍数400X)

10.粒度分析仪:激光衍射型(测量范围0.1-1000μm,精度±1%)

11.pH计:高精度数字式(范围0-14,分辨率0.01)

12.恒温水浴锅:循环模型(温度范围5-99℃,稳定性±0.1℃)

13.离心机:高速冷冻型(转速≤20,000rpm,容量4x100mL)

14.气相色谱仪:GC-FID配置(毛细管柱,检测限0.1ppm)

15.实时PCR仪:定量模型(温度梯度±0.2℃,通道数

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是与"脱氧核糖核酸酶I"相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

    材料检测服务

    专业分析各类金属、非金属材料的成分、结构与性能,提供全面检测报告和解决方案。包括金属材料力学性能测试、高分子材料老化试验、复合材料界面分析等。

    化工产品分析

    精准检测各类化工产品的成分、纯度及物理化学性质,确保产品质量符合国家标准。服务涵盖有机溶剂分析、催化剂表征、高分子材料分子量测定等。

    环境检测服务

    提供土壤、水质、气体等环境检测服务,助力环境保护与污染治理,共建绿色家园。包括VOCs检测、重金属污染分析、水质生物毒性测试等。

    科研检测认证

    凭借专业团队和先进设备,致力于为企业研发、质量控制及市场准入提供精准可靠的技术支撑,助力品质提升与合规发展。