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异柠檬酸裂合酶

  • 原创官网
  • 2025-04-30 09:24:19
  • 关键字:异柠檬酸裂合酶测试方法,异柠檬酸裂合酶测试案例,异柠檬酸裂合酶测试周期
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异柠檬酸裂合酶概述:异柠檬酸裂合酶(IsocitrateLyase,ICL)是乙醛酸循环中的关键酶,广泛存在于微生物、植物及部分真核生物中。其活性检测对研究代谢调控、病原微生物鉴定及工业酶制剂质量控制具有重要意义。本文重点阐述该酶的检测项目参数、适用材料范围、标准化方法及核心设备配置,为实验室提供技术参考。


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注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

CMA/CNAS等证书详情,因时间等不可抗拒因素会发生变更,请咨询在线工程师。

☌ 询价

检测项目

1. 酶活性测定:反应体系含50 mM Tris-HCl缓冲液(pH 7.5),底物浓度0.5-5 mM异柠檬酸,25℃下监测340 nm处NADH消耗速率

2. 比活力计算:以单位时间内催化1 μmol底物转化所需的酶量定义(U/mg),误差范围≤±5%

3. pH稳定性测试:考察pH 6.0-9.0范围内酶活保留率(37℃孵育1 h)

4. 热稳定性分析:30-60℃梯度温育30 min后残余活性测定

5. 抑制剂效应评估:测试草酰乙酸(0.1-10 mM)、3-硝基丙酸(1-100 μM)的IC50值

检测范围

1. 微生物样本:结核分枝杆菌、白色念珠菌等病原微生物培养物

2. 临床样本:肺泡灌洗液/痰液中病原微生物分泌酶检测

3. 工业酶制剂:重组表达型异柠檬酸裂合酶纯度验证

4. 植物组织:油料作物种子乙醛酸循环相关酶系分析

5. 食品添加剂:柠檬酸生产菌株代谢通路关键酶监测

检测方法

ISO 21703:2019《生物技术-酶活性测定-异柠檬酸裂解酶分光光度法》

ASTM E2694-16《Standard Test Method for Measurement of Hydrolase Enzyme Activity》

GB/T 34799-2017《蛋白酶K活性检测方法》中比色法改良方案

GB 4789.43-2016《食品微生物学检验 病原菌毒力基因检测》相关技术规范

Pharmacopoeia Europa 10.0(2.6.12章)酶活性测定通则

检测设备

1. Thermo Scientific Genesys 150 UV-Vis分光光度计:波长范围190-1100 nm,温控精度±0.1℃

2. Agilent 1260 Infinity II HPLC系统:配备DAD检测器,用于底物/产物定量分析

3. Eppendorf Mastercycler X50梯度PCR仪:温度均一性±0.1℃,支持快速升降温程序

4. Beckman Coulter Optima XPN-80超速离心机:最大转速80,000 rpm,温控范围-20℃至40℃

5. Malvern Zetasizer Nano ZS动态光散射仪:粒径测量范围0.3 nm-10 μm,用于酶聚集状态分析

6. Bio-Rad Mini-PROTEAN Tetra电泳系统:电压范围10-500 V,支持Native-PAGE活性染色

7. Mettler Toledo SevenExcellence pH计:分辨率0.001 pH,自动温度补偿功能

8. Memmert INCOmed培养箱:温度范围0-70℃,CO2浓度控制精度±0.1%

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

  以上是与异柠檬酸裂合酶相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

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