硫胺素三磷酸酶概述:硫胺素三磷酸酶(ThiamineTriphosphatase,ThTP酶)是参与硫胺素代谢的关键酶类,其活性与能量代谢及神经功能密切相关。本文针对ThTP酶的检测要点展开分析,涵盖酶活性测定、底物特异性分析、热稳定性评估等核心项目,适用于生物样本、医药制剂及食品添加剂的合规性检测。检测过程严格遵循ISO、GB/T等标准方法,确保数据准确性与可重复性。
注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).
CMA/CNAS等证书详情,因时间等不可抗拒因素会发生变更,请咨询在线工程师。
1. 酶活性测定:定量分析单位时间内ATP水解量(U/mg蛋白),反应体系含50mM Tris-HCl缓冲液(pH 7.4)、5mM MgCl₂及1mM ThTP
2. 比活性计算:基于Bradford法测定蛋白浓度(mg/mL),计算比活性(U/mg)
3. 动力学参数测定:通过Lineweaver-Burk双倒数法计算Km值(μM)和Vmax(μmol/min·mg)
4. 热稳定性评估:在25-75℃温度梯度下测定残余酶活率(%),记录T50值
5. pH耐受性测试:在pH 4.0-9.0范围内测定最适pH值及稳定区间
1. 生物样本:哺乳动物脑组织匀浆液、红细胞裂解液、线粒体提取物
2. 医药制剂:维生素B1复合注射液、神经修复类口服片剂
3. 食品添加剂:营养强化乳制品、谷物类婴幼儿辅食
4. 饲料添加剂:畜禽用复合维生素预混料
5. 科研试剂:重组人源ThTP酶冻干粉(纯度≥95%)
1. ISO 20633:2015《婴幼儿配方食品中维生素B1的测定—高效液相色谱法》
2. GB/T 5009.197-2003《保健食品中硫胺素、核黄素的测定》
3. ASTM E2694-16《Standard Test Method for Measurement of Adenosine Triphosphate in Water-Miscible Metalworking Fluids》
4. GB 5413.11-2010《婴幼儿食品和乳品中维生素B₁的测定》
5. ISO 6867:2000《动物饲料--维生素B₁含量的测定--微生物法》
1. Agilent 1260 Infinity II HPLC系统:配备DAD检测器(190-950nm),用于硫胺素代谢产物定量分析
2. Shimadzu UV-2600i紫外分光光度计:波长精度±0.1nm,支持动力学模式连续监测340nm吸光度变化
3. Thermo Scientific Sorvall ST 16R离心机:最大转速16,000rpm,用于细胞器分离及蛋白沉淀
4. Eppendorf Mastercycler X50 PCR仪:温度均一性±0.1℃,执行酶热稳定性梯度实验
5. Malvern Zetasizer Nano ZSP动态光散射仪:测量酶分子粒径分布(0.3nm-10μm)及聚集状态
6. BioTek Synergy H1多功能酶标仪:支持荧光强度(Ex/Em=365/450nm)及化学发光检测模式
7. Metrohm 848 Titrino Plus自动电位滴定仪:分辨率0.1mV,用于反应体系pH精确调控
8. Mettler Toledo XPR205DR微量天平:称量精度0.01mg,确保标准品精确称量
9. Memmert INCOmed培养箱:温度波动±0.1℃,提供恒温反应环境
10. Waters ACQUITY UPLC H-Class系统:配备QDa质谱检测器,用于复杂基质中痕量成分分析
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。
以上是与硫胺素三磷酸酶相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。