检测项目
1. GAA基因全外显子测序：覆盖NM_000152.3全部20个外显子及剪切区域，测序深度≥500×
2. 酸性α-葡萄糖苷酶活性测定：白细胞/成纤维细胞中酶活性定量（正常参考值＞30 nmol/mg蛋白/h）
3. 心肌组织糖原染色：PAS染色定量分析（糖原沉积量＞1.5%湿重为阳性）
4. 血清肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）测定：化学发光法检测阈值＞25 U/L
5. 尿葡萄糖四聚体（Glc4）筛查：LC-MS/MS法测定临界值≥7.0 mmol/mol肌酐
检测范围
1. EDTA抗凝全血样本（采集后8小时内分离白细胞）
2. 骨骼肌/心肌活检组织（液氮速冻保存）
3. 皮肤成纤维细胞培养物（传代≤5代）
4. 新生儿干血片样本（Whatman 903滤纸）
5. 尸检心脏标本（福尔马林固定石蜡包埋）
检测方法
1. ISO 15189:2012《医学实验室质量和能力要求》指导整体质控体系
2. CLSI EP17-A2规范酶活性测定线性范围验证
3. GB/T 37864-2019《生物样本库质量和能力通用要求》管理样本存储
4. WS/T 420-2013《临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》指导试剂验证
5. ACMG AMP联合指南(2015)规范基因变异解读流程
检测设备
1. Illumina NextSeq 550Dx基因测序系统：双流动槽设计通量15-40 Gb/run
2. Thermo Fisher QuantStudio 5实时荧光定量PCR仪：支持TaqMan探针法绝对定量
3. Roche Cobas c 501全自动生化分析仪：CK-MB检测灵敏度0.1 U/L
4. AB Sciex API 4000三重四极杆质谱仪：Glc4检测分辨率0.01 mmol/mol
5. Leica DMi8倒置荧光显微镜：配备LAS X图像分析模块
6. Eppendorf Centrifuge 5430R冷冻离心机：最大RCF30,130×g
7. Thermo Scientific Multiskan SkyHigh酶标仪：吸光度精度±1% (0-3 OD)
8. Miltenyi Biotec GentleMACS Octo解离仪：标准化组织处理程序
9. Sartorius Cubis MCA微量天平：称量精度0.001 mg
10. Panasonic MCO-170AIC CO₂培养箱：温度波动±0.1℃