检测项目

1. SCA1（ATXN1基因）动态突变检测：CAG重复次数测定（正常范围6-44次）

2. SCA2（ATXN2基因）全外显子测序：覆盖chr12:111,042,329-111,133,798区域

3. FRDA（FXN基因）GAA重复扩增分析：第一内含子GAA重复数定量（正常≤36次）

4. SCA7（ATXN7基因）三核苷酸重复检测：CAG重复次数阈值判定（致病≥37次）

5. POLG基因复合杂合突变筛查：包含22个外显子及剪切位点分析

检测范围

1. 外周血基因组DNA（浓度≥20ng/μL，OD260/280=1.8-2.0）

2. 唾液样本（采集量≥2mL，DNA得率≥5μg）

3. 羊水细胞培养物（传代≤3代）

4. 石蜡包埋组织（切片厚度10μm×10片）

5. 干血斑样本（直径≥1cm双斑采集）

检测方法

1. 三引物PCR扩增法（GB/T 30988-2014）动态突变检测

2. 二代测序技术（ISO/IEC 17025:2017）全外显子捕获测序

3. 长片段PCR结合毛细管电泳（ASTM E3136-18）大片段扩增分析

4. Sanger测序验证（GB/T 29889-2013）点突变确认

5. MLPA技术（ISO 15189:2012）拷贝数变异检测

检测设备

1. Illumina NextSeq 550D测序仪：高通量双流动槽运行模式

2. Thermo Fisher QuantStudio 7 Pro实时定量PCR仪：96孔板快速热循环系统

3. Agilent 4200 TapeStation系统：DNA完整性评估（DIN值≥7.0）

4. Applied Biosystems 3500xL Genetic Analyzer：毛细管电泳片段分析

5. Beckman Coulter Biomek i7自动化工作站：核酸提取与体系构建

6. Covaris M220聚焦超声破碎仪：DNA片段化控制（150-200bp）

7. QIAGEN GeneRead DNAseq Panel：靶向捕获探针覆盖SCA相关基因

8. Roche KAPA HyperPlus建库试剂盒：低起始量DNA文库制备

9. Bio-Rad CFX96 Touch深孔模块：多重PCR扩增效率监控

10. Oxford Nanopore GridION X5：长读长结构变异分析