反转录检测

检测项目

1. RNA完整性检测：RIN值≥7.0（Agilent 2100 Bioanalyzer），28S/18S rRNA比值≥1.8

2. 逆转录酶活性测定：≥50 U/μL（M-MLV标准品对比），扩增效率90-110%

3. cDNA产物纯度检测：OD260/OD280=1.8-2.0（NanoDrop测定），基因组DNA残留≤0.1%

4. 引物二聚体分析：熔解曲线Tm值差异≥5℃（SYBR Green I法）

5. 外源RNA酶污染检测：阴性对照Ct值≥35（qPCR扩增）

检测范围

1. 临床生物样本：血清/血浆游离RNA（浓度≥10 pg/μL）

2. 细胞培养物：总RNA提取物（产量≥1 μg/106细胞）

3. 病毒载体产品：慢病毒/腺相关病毒载体RNA包装完整性

4. 分子诊断试剂盒：RT-qPCR预混液批间一致性验证

5. 疫苗类产品：mRNA疫苗原液纯度与完整性评估

检测方法

1. ISO 20395:2019 生物技术-核酸定量方法-实时荧光定量PCR法

2. GB/T 37875-2019 RNA测序文库构建质量控制通则

3. ASTM E3028-22 逆转录酶活性标准测试方法

4. GB/T 34796-2017 核酸浓度与纯度测定（紫外分光光度法）

5. ISO 20186-3:2022 分子体外诊断检验-第3部分：逆转录PCR检验流程

检测设备

1. Thermo Fisher QuantStudio 5：实时荧光定量PCR系统（支持96/384孔板）

2. Agilent 2100 Bioanalyzer：微流控芯片电泳仪（RNA完整性数值化分析）

3. Beckman Coulter DTX 880：多功能酶标仪（荧光/化学发光多模式检测）

4. Roche LightCycler 480 II：高分辨率熔解曲线分析系统

5. Qiagen QIAxpert：微滴式数字PCR仪（绝对定量分析）

6. Eppendorf Mastercycler X50s：梯度PCR仪（温控精度±0.1℃）

7. NanoDrop One/OneC：微量核酸蛋白分析仪（1 μL样本检测）

8. Bio-Rad CFX Opus 96：全自动qPCR系统（动态范围达10个数量级）

9. PerkinElmer LabChip GXII：自动化电泳工作站（通量200样本/日）

10. Sartorius Cubis II MSA：百万分之一天平（称量精度0.001 mg）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"反转录检测"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检检测技术研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。