检测项目
1.病毒外壳蛋白（CP）基因序列检测：目标片段长度500-800bp，退火温度552℃
2.DNA-A全基因组扩增：覆盖2.7-3.0kb全长序列
3.病毒载量定量分析：灵敏度≥10copies/μL
4.血清学ELISA检测：OD450值阳性阈值＞0.35
5.系统侵染率测定：茎尖分生组织带毒率≤5%
检测范围
1.甘薯组培脱毒种苗（包括茎尖、愈伤组织）
2.田间采集叶片样本（嫩叶与老叶分层取样）
3.土壤及栽培基质残留物
4.烟粉虱媒介昆虫群体
5.进出口种质资源（块根、藤蔓）
检测方法
ISO17025:2017《分子生物学定量检测通用要求》
GB/T28057-2011《植物病毒分子检测规范》
SN/T2127-2008《进出境种苗病毒检疫规程》
ICTV第15次报告修订的PCR引物设计原则
OEPP/EPPOPM7/98(2)甘薯病毒诊断协议
检测设备
1.AppliedBiosystemsQuantStudio5实时荧光定量PCR仪：用于病毒载量绝对定量
2.Bio-RadChemiDocMP成像系统：核酸电泳及WesternBlot分析
3.ThermoScientificNanoDropOne超微量分光光度计：核酸纯度测定（A260/A280≥1.8）
4.EppendorfMastercyclerX50梯度PCR仪：支持多重退火温度优化
5.Agilent4200TapeStation系统：DNA完整性评估（DIN值＞7）
6.BeckmanCoulterBiomeki5自动化工作站：高通量核酸提取
7.OlympusBX53荧光显微镜：免疫荧光标记观察
8.MerckMilliporeScepter3.0细胞计数器：媒介昆虫群体密度测定