检测项目
1.幼虫形态特征鉴定:头壳宽度0.8-1.2mm,腹足趾钩单序环形排列
2.DNA条形码分析:COI基因序列比对(GenBank数据库相似度≥98%)
3.抗药性基因检测:GABA受体基因突变位点(A301S/T)筛查
4.卵块生物测定:孵化率统计(温度251℃,湿度75%条件下)
5.肠道微生物分析:16SrRNA测序(V3-V4区扩增引物341F/806R)
检测范围
1.玉米田土壤样本(耕作层0-20cm)
2.水稻植株残体(茎秆基部10cm段)
3.仓储小麦籽粒(含水量≤14%)
4.诱捕器粘虫板(性信息素诱芯残留物)
5.转基因抗虫作物叶片(Bt蛋白表达量≥5μg/g)
检测方法
ISO21702:2019昆虫抗药性测定标准(点滴法)
GB/T36850-2018植物检疫害虫分子检测规程
ASTME2813-18昆虫DNA提取与纯化标准
NY/T3088-2017草地贪夜蛾田间监测技术规范
SN/T5439-2022进出境粮谷中鳞翅目幼虫检疫鉴定
检测设备
1.LeicaM205C体视显微镜(20.5:1变倍比,LED冷光源)
2.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪(96孔模块)
3.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机(最大转速30,000rpm)
4.IlluminaNovaSeq6000测序系统(双流动槽配置)
5.Agilent4200TapeStation生物分析仪(DNA灵敏度0.1ng/μL)
6.OlympusBX53荧光显微镜(UIS2光学系统)
7.SartoriusCP225D电子天平(0.01mg分辨率)
8.MemmertIPP110培养箱(温度波动0.1℃)
9.BioTekSynergyH1酶标仪(四光栅单色器)
10.HamiltonMICROLABSTARlet液体工作站(4通道移液臂)