无病毒植株检测

无病毒植株检测是确保植物健康繁殖与生产安全的关键环节,重点针对病毒核酸、抗原及病理特征进行系统性分析。核心检测项目包括病毒种类鉴定、核酸浓度测定、抗原活性验证等,需依据ISO、GB/T等标准方法执行。本文详述检测技术要点及规范流程,为科研与产业应用提供技术参考。

原创阅读 62025-05-13工程师CMACNASISO高新技术企业

检测项目

1.马铃薯Y病毒(PVY)核酸检测:采用RT-qPCR法,检测限≤0.1pg/μL
2.黄瓜花叶病毒(CMV)衣壳蛋白ELISA检测:灵敏度≥1:10000稀释度
3.苹果茎沟病毒(ASGV)全基因组测序:覆盖度≥99%,测序深度30
4.植物内源病毒载量测定:数字PCR定量分析,精度0.5log10拷贝数
5.病毒粒子电镜观察:负染法分辨率3nm,粒径测量误差5%

检测范围

1.马铃薯脱毒苗及微型薯繁育材料
2.草莓组培苗与匍匐茎分生组织
3.柑橘嫁接用接穗与砧木离体材料
4.兰花原球茎及再生植株
5.木本植物茎尖培养物与休眠芽

检测方法

ISO17025:2017《分子生物学检测通用要求》
GB/T34777-2017《植物病毒双抗体夹心ELISA检测规程》
ASTME3060-16《植物病原体实时荧光PCR标准指南》
GB/T36810-2018《木本植物病毒电镜检测技术规范》
ISO21571:2005《食品中核酸提取方法》植物材料扩展应用

检测设备

1.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪:支持TaqMan探针法多重检测
2.Agilent2100生物分析仪:核酸质量评估(RIN≥7.0)
3.BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪:病毒抗原标记定量分析
4.JEOLJEM-1400Flash透射电镜:80kV加速电压下病毒形态观测
5.BioTekSynergyH1多功能酶标仪:ELISA吸光度读取(OD450nm)
6.CovarisM220聚焦超声破碎仪:植物组织均质化处理(强度5W,20s)
7.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机:最大rcf30,130g
8.MiltenyiBiotecgentleMACS全自动组织处理器:程序化核酸提取流程
9.IlluminaNovaSeq6000测序平台:PE150双端测序模式
10.LeicaCM1950冰冻切片机:样本制备厚度10μm2μm

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

  • 报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
  • 检测周期:7~15工作日,可加急。
  • 资质:旗下实验室拥有CMA/CNAS/ISO资质。
  • 标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
  • 非标测试:支持定制化试验方案。
  • 售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

QUALIFICATIONS

旗下实验室 · 资质荣誉

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