检测项目

1.病毒核酸定量检测：采用实时荧光定量PCR法（qPCR），灵敏度≤10copies/μL

2.外壳蛋白抗原检测：双抗体夹心ELISA法，检出限0.1ng/mL

3.全基因组测序分析：IlluminaNovaSeq平台测序深度≥50

4.侵染活性测定：本氏烟接种试验，病灶面积测量精度0.5mm

5.血清学交叉反应测试：WesternBlot法验证抗体特异性

检测范围

1.茄科植物叶片样本（番茄/辣椒/烟草）

2.葫芦科作物种子（西瓜/黄瓜/南瓜）

3.土壤及栽培基质中病毒残留物

4.昆虫介体（烟粉虱/蚜虫）带毒率检测

5.组培苗病毒脱除效果验证

检测方法

ISO16140-3:2022《分子生物学方法验证规范》

GB/T3543.5-1995《农作物种子检验规程》

ASTME3066-2016《植物病毒ELISA检测指南》

GB/T28068-2011《番茄斑萎病毒检疫鉴定方法》

OEPPPM7/113(1)《国际植物保护公约》病毒分离标准

检测设备

1.ThermoFisherQuantStudio5：实时荧光定量PCR仪，支持TaqMan探针法

2.BioTekSynergyH1：多功能酶标仪，含荧光/化学发光模块

3.IlluminaNovaSeq6000：高通量测序系统，通量20Breads/run

4.LeicaDM3000LED：正置荧光显微镜，配备DFC7000T相机

5.EppendorfCentrifuge5430R：高速冷冻离心机，最大rcf30,130g

6.Agilent4200TapeStation：核酸质量分析系统，灵敏度0.1ng/μL

7.BeckmanCoulterCytoFLEXS：流式细胞仪，检测粒径范围0.2-40μm

8.MemmertIPP110：智能型恒温培养箱，温度均匀性0.3℃

9.MiltenyiBiotecGentleMACS：组织破碎仪，程序化裂解参数设置

10.SartoriusCP225D：精密分析天平，称量精度0.01mg