检测项目

1.抑制剂活性测定：采用荧光底物法测定IC50值（半抑制浓度），精度0.5nM

2.纯度分析：HPLC法测定主成分含量≥98.5%，杂质峰面积≤1.2%

3.热稳定性测试：加速实验（40℃/75%RH）下活性保持率≥90%（30天）

4.分子量确认：MALDI-TOF质谱分析偏差≤0.05%

5.微生物限度：需氧菌总数≤10CFU/g（GB4789.2-2022）

检测范围

1.生物制药原料：重组钙蛋白酶抑制剂原液及中间体

2.口服固体制剂：肠溶片剂、缓释胶囊的溶出度验证

3.注射用冻干粉针：无菌检查与内毒素控制（＜0.25EU/mg）

4.功能性食品添加剂：运动营养品中抑制剂含量标定

5.体外诊断试剂：ELISA试剂盒标准品定值

检测方法

1.ISO20776-1:2019抗菌剂体外活性测定通则

2.GB/T37841-2019生物制品中蛋白酶抑制剂活性测定法

3.USP<1112>酶抑制剂类药品质量评价指南

4.ASTME2945-14高通量酶抑制筛选标准方法

5.GB5009.256-2016食品中蛋白酶抑制剂测定液相色谱法

检测设备

1.Agilent1260InfinityIIHPLC系统：配备DAD检测器（190-900nm），色谱柱ZORBAXSB-C18（4.6250mm,5μm）

2.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪：支持96/384孔板动力学扫描（340-850nm）

3.WatersXevoG2-XSQTOF质谱仪：质量精度＜1ppm（m/z50-2000）

4.MettlerToledoTGA/DSC3+热分析系统：温度范围25-1000℃（0.1℃）

5.ShimadzuUV-2600i分光光度计：带宽0.1/0.5/1/2/5nm可调

6.MalvernZetasizerNanoZSP粒度分析仪：测量范围0.3nm-10μm

7.EppendorfBioPhotometerD30核酸蛋白分析仪：内置预编程酶活测定程序

8.SartoriusCubisII微量天平：称量范围0.001mg-52g（d=0.001mg）

9.MemmertHPP750恒温恒湿箱：温控精度0.1℃，湿度范围10-98%RH

10.MilliporeMilli-QIQ7000超纯水系统：产水电阻率18.2MΩcm@25℃