检测项目
1.诺如病毒GI/GII型抗原检测:采用双抗体夹心法,灵敏度≥95%,特异性≥98%
2.病毒载量定量分析:RT-qPCR法测定ORF1/ORF2区域拷贝数,检测下限50copies/mL
3.基因分型检测:VP1区序列分析,覆盖9个基因群32个基因型
4.血清抗体IgG/IgM检测:间接ELISA法,OD450nm临界值≥0.3
5.环境样本病毒存活率测定:TCID50法测定感染性病毒颗粒浓度
检测范围
1.临床样本:急性期患者粪便(采集量≥5g)、呕吐物(≥2mL)
2.食品基质:贝类消化腺组织(牡蛎/贻贝取样10g)、生食蔬菜(叶菜类取样25g)
3.水体样本:饮用水(过滤500mL)、污水(浓缩1000mL)
4.环境拭子:食品加工表面(1010cm采样区域)、餐具(无菌棉签涂抹采样)
5.生物安全样本:实验室培养毒株(GII.4Sydney_2012标准株)
检测方法
ISO/TS15216-1:2017食品链微生物学-病毒实时RT-PCR水平方法
GB/T40982-2021新型冠状病毒核酸检测通则(适用于诺如病毒核酸提取)
FDABAMChapter26:DetectionofNorovirusinFoods
WS/T799-2022诺如病毒感染诊断标准(中国卫生行业标准)
ASTME3022-18StandardGuideforDetectionofNorovirusinWater
检测设备
1.AppliedBiosystems7500FastDx实时荧光定量PCR仪:TaqMan探针法核酸扩增,支持FAM/HEX双通道检测
2.KingFisherFlex全自动核酸提取仪:磁珠法处理样本通量96孔/次,适配粪便裂解缓冲液
3.BioTekSynergyH1酶标仪:450nm波长ELISA读数,4PL标准曲线拟合功能
4.JEOLJEM-1400Flash透射电镜:120kV加速电压观察27-40nm病毒颗粒形态
5.MileniaHybriDetect1横向流层析仪:胶体金试纸条快速筛查GI/GII抗原
6.SartoriusVivaspin20超滤离心管(100kDaMWCO):水样病毒浓缩前处理装置
7.ThermoScientificNuncMaxiSorpELISA板:高结合力表面包被单克隆抗体
8.QiagenQIAampViralRNAMiniKit:硅胶膜柱式RNA提取试剂盒
9.HamiltonMicrolabSTARlet液体工作站:自动化加样精度1μL
10.OlympusBX53荧光显微镜:EVOS照明系统观察细胞病变效应(CPE)