检测项目
1.真菌性病害检测:孢子形态鉴定(直径10-200μm)、菌丝生长速率(mm/d)、产孢量(孢子数/cm)、毒素含量(μg/g)
2.细菌性病害检测:革兰氏染色反应(阳性/阴性)、16SrDNA序列比对(相似度≥99%)、脂肪酸甲酯谱分析(MIDI系统)、致病基因PCR扩增(hrp/tss基因)
3.病毒性病害检测:病毒粒子电镜观察(20-300nm)、ELISA抗体效价(OD值≥0.5)、RT-PCR扩增产物(100-2000bp)、病毒载量测定(copies/μgRNA)
4.线虫病害检测:二龄幼虫计数(条/100g土)、口针长度测量(15-25μm)、rDNA-ITS序列分析(500-900bp)、侵染阈值测定(J2/g土壤)
5.生理性病害检测:叶绿素含量(SPAD值)、细胞膜透性(相对电导率%)、酶活性测定(SOD/CAT/PODU/gFW)、矿质元素分析(N/P/Kppm)
检测范围
1.植株组织样本:叶片病斑组织(直径≥3mm)、茎秆维管束切片(厚度20μm)、根系分泌物提取液
2.种子种苗材料:种子表面带菌量(CFU/粒)、组培苗病毒潜伏感染率、嫁接接口病原侵染深度
3.土壤基质样品:根际土壤微生物群落结构、土传病原菌垂直分布(0-50cm分层)
4.农产品残留物:果实采后腐烂病原鉴定、仓储霉变产物毒素类型
5.昆虫媒介载体:蚜虫/粉虱传毒效率测定(病毒粒子/头)、线虫携带菌量定量
检测方法
1.ISO16140-3:2021食品链微生物学-方法验证-第3部分:植物病原菌定性检测协议
2.GB/T3543.5-1995农作物种子检验规程真实性和品种纯度鉴定
3.ASTMD8083-16植物病毒实时荧光定量PCR检测标准指南
4.GB/T36850-2018植物检疫病毒检测规范
5.ISO21469:2018植物病原真菌分子鉴定技术规范
检测设备
1.Bio-RadCFX96Touch实时荧光定量PCR仪:病毒/细菌核酸绝对定量分析
2.ThermoScientificMultiskanSky全波长酶标仪:ELISA法抗体效价测定
3.HitachiSU8010场发射电镜:病毒粒子超微结构观测
4.OlympusBX53荧光显微镜:病原菌原位杂交定位观察
5.Agilent7890B气相色谱仪:脂肪酸甲酯谱微生物鉴定
6.Eppendorf5920R高速冷冻离心机:核酸/蛋白低温分离提取
7.MemmertIPP110培养箱:病原菌梯度温度培养实验
8.LI-COROdysseyCLx红外成像系统:Westernblot蛋白互作分析
9.BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪:单孢子活力快速检测
10.PerkinElmerNexION350DICP-MS:重金属胁迫元素定量分析