1.荧光标记效率测定:采用荧光分光光度法检测标记率≥95%,激发波长/发射波长根据染料类型设定(如FAM495/520nm)
2.核酸纯度分析:OD260/OD280比值1.8-2.0,OD260/OD230比值≥2.0
3.标记密度验证:每1000碱基含1-4个标记位点(HPLC-MS联用测定)
4.热稳定性测试:95℃处理30分钟后保留率≥85%
5.定量准确性验证:标准曲线R值≥0.998(浓度范围0.1-100nM)
6.酶切耐受性测试:经EcoRI/HindIII双酶切后完整度≥90%
1.质粒DNA:超螺旋结构载体(3-20kb),适用于基因编辑研究
2.病毒RNA:包膜病毒基因组(如SARS-CoV-2全长29.9kbRNA)
3.合成寡核苷酸:长度20-100bp的探针/引物序列
4.基因组DNA:哺乳动物提取样本(片段化至500-5000bp)
5.细胞RNA:总RNA样本(RIN值≥7.0)
6.甲基化DNA:经亚硫酸盐处理的修饰核酸样本
ASTME2148-01:StandardTestMethodforDeterminationofFluorochromeLabelingEfficiency
ISO20395:2019Biotechnology-Requirementsforevaluatingtheperformanceofnucleicacidquantificationmethods
GB/T34797-2017核酸定量检测通用技术要求
GB/T37874-2019生物样品中核酸类物质检测规范
ISO/IEC17025:2017检测实验室通用能力要求
YY/T1256-2020体外诊断试剂用核酸纯化试剂盒技术要求
ThermoFisherQuantStudio5Real-TimePCRSystem:支持TaqMan探针法的绝对定量分析
Agilent2100Bioanalyzer:执行DNA/RNA完整性及片段分布检测(芯片灵敏度0.5ng/μL)
NanoDropOneCMicrovolumeUV-VisSpectrophotometer:测量A260/A280纯度及浓度(检测范围2-27,500ng/μL)
BeckmanCoulterCytoFLEXSFlowCytometer:多色荧光标记效率分析(配置3激光13色检测通道)
WatersACQUITYUPLCH-ClassSystem:超高效液相色谱进行标记密度测定(BEHC18色谱柱)
AppliedBiosystems3500xLGeneticAnalyzer:毛细管电泳法验证片段长度(分辨率1bp)
MalvernZetasizerPro:动态光散射法测定核酸复合物粒径(测量范围0.3nm-10μm)
RocheLightCycler480II:执行熔解曲线分析验证探针特异性(温度分辨率0.1℃)
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。
以上是与末端标记核酸检测相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。