检测项目
1.形态学鉴定:成虫翅展35-50mm,前翅灰褐色具剑状纹;幼虫体长40-50mm,体表颗粒状突起密度≥12个/mm
2.分子生物学检测:COI基因序列比对(GenBank登录号KF015432),特异性引物IPS-F/R扩增产物长度658bp
3.性信息素分析:(Z)-7-十二碳烯乙酸酯含量≥98%,(Z)-9-十四碳烯乙酸酯占比≤2%
4.抗药性监测:拟除虫菊酯类LC50值测定(浓度梯度0.1-100mg/L),乙酰胆碱酯酶活性抑制率≥80%
5.卵期监测:卵粒直径0.60.05mm,表面纵脊数14-16条/卵
检测范围
1.粮食作物:玉米、小麦、水稻幼苗根系样本(根茎比≤0.3)
2.经济作物:棉花、烟草、甜菜叶片受害斑(直径≥3mm)
3.仓储产品:谷物表层虫蛀颗粒(蛀孔直径1.2-1.8mm)
4.土壤样本:耕作层(0-20cm)越冬蛹密度测定
5.植物检疫材料:进出口苗木根部携带幼虫活体检出
检测方法
1.GB/T18085-2008《植物检疫鳞翅目害虫鉴定规范》成虫形态鉴定法
2.ISO21571:2005分子生物学检测中DNA提取与PCR扩增流程
3.ASTME2455-06昆虫性信息素气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析方法
4.GB/T31715-2015昆虫抗药性生物测定方法(浸叶法)
5.SN/T2036-2007进出境植物繁殖材料有害生物检疫规程
检测设备
1.NikonEclipseCi-L生物显微镜(40-1000倍):虫体细微结构观察与测量
2.Bio-RadT100ThermalCyclerPCR仪:特异性基因片段扩增
3.Agilent7890B/5977AGC-MS联用仪:性信息素成分定性与定量分析
4.Eppendorf5424R高速冷冻离心机:DNA提取样本处理(转速≥14,000rpm)
5.LeicaM205C体视显微镜(20-160倍):卵粒表面微结构观测
6.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪:乙酰胆碱酯酶活性测定(波长412nm)
7.SartoriusCPA225D电子天平(精度0.01mg):药剂称量与配置
8.MemmertIPP110培养箱(温控0.5℃):幼虫标准化饲养环境控制
9.OlympusDP27显微成像系统(2000万像素):形态学特征数字化记录
10.IlluminaMiSeq测序平台:线粒体基因组全序列分析(PE300模式)