检测项目
1.真菌培养鉴定：采用沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA)与脑心浸液琼脂(BHI)，培养温度28℃/37℃双相培养14-21天
2.组织病理学检查：HE染色观察3-5μm卵圆形酵母细胞，GMS染色确认细胞壁黑色素沉积
3.PCR扩增检测：靶向ITS1-5.8S-ITS2区域(引物序列ITS1:5'-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3'/ITS4:5'-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3')
4.血清学ELISA：检测抗Hcp100抗原IgG抗体，临界值OD450≥0.8判为阳性
5.药敏试验：CLSIM38-A2标准测试两性霉素B(0.03-16μg/mL)、伊曲康唑(0.015-8μg/mL)等抗真菌药物MIC值
检测范围
1.临床标本：骨髓穿刺液、淋巴结活检组织、支气管肺泡灌洗液(BALF)
2.血液成分：外周血单核细胞(PBMC)、血清样本
3.环境样本：土壤样品(采集深度10-20cm)、蝙蝠洞穴沉积物
4.实验动物模型：感染小鼠脾脏组织、豚鼠肝脏病理切片
5.质控物质：ATCC26032标准菌株、WHO/IUIS抗血清参考品
检测方法
ISO15189:2012《医学实验室质量和能力要求》规范实验室管理体系
CLSIMM18-A《核酸扩增方法验证指南》指导PCR检测验证方案
GB/T38502-2020《病原微生物实验室生物安全通用准则》规定BSL-3防护要求
ASTME2148-16《真菌分子鉴定标准指南》规范DNA提取与测序流程
WS/T797-2022《临床真菌检验技术要求》规定镜检与培养操作规范
检测设备
ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪：用于Hcp100基因绝对定量分析
BectonDickinsonBACTECMGIT960全自动分枝杆菌/真菌培养系统：支持液体培养基快速培养
LeicaDM500光学显微镜：配置100油镜观察酵母相形态特征
SiemensADVIACentaurXP化学发光免疫分析仪：执行H/M抗原定量检测
SartoriusIncuSafeCO₂培养箱：维持5%CO₂浓度37℃恒温培养环境
IlluminaMiSeq测序平台：完成ITS区域二代测序(2300bp双端读长)
BioTekSynergyH1酶标仪：读取ELISA板OD450/630nm吸光度值
Eppendorf5430R高速冷冻离心机：实现16,000g条件下病原体核酸富集
MettlerToledoXSR205DU分析天平：精确称量培养基成分(精度0.01mg)
ESCOA2型生物安全柜：提供ISOClass5级样本处理环境