检测项目
1.跨膜结构域分析:通过α螺旋/β折叠占比测定(精度0.5%)、拓扑结构预测(置信度≥95%)
2.蛋白浓度测定:紫外分光法(A280nm)、BCA法(灵敏度0.5μg/mL)
3.纯度鉴定:SDS-PAGE(分辨率1.5kDa)、HPLC(柱效≥20,000理论塔板数)
4.功能活性测试:ATP酶活性(单位μmol/min/mg)、离子通道通量(pA/pF级)
5.相互作用研究:表面等离子共振(KD值测定范围1nM-100μM)、荧光共振能量转移(FRET效率≥15%)
检测范围
1.细胞膜分离蛋白提取物(哺乳动物/细菌/酵母来源)
2.重组表达跨膜蛋白药物(GPCRs、离子通道等)
3.脂质体包裹膜蛋白制剂(粒径50-200nm)
4.抗膜蛋白单克隆抗体(效价≥1:10,000)
5.跨膜受体蛋白复合物(分子量>150kDa)
检测方法
ASTMF3134-21《重组膜蛋白纯度分析方法》
ISO10993-18:2020《生物材料表面蛋白吸附测试》
GB/T34818-2017《蛋白质定量测定分光光度法》
GB5009.258-2016《食品中膜结合蛋白检测》
ISO20676:2018《冷冻电镜单颗粒分析技术规范》
检测设备
1.ThermoOrbitrapFusionLumos:高分辨质谱仪(分辨率450,000@m/z200)
2.Agilent2100Bioanalyzer:微流控芯片电泳系统(DNA/RNA/Protein分析)
3.MalvernZetasizerPro:动态光散射仪(粒径测量0.3nm-10μm)
4.GEAKTApure25:层析系统(压力范围0-25MPa)
5.BrukerNanoTemperMonolith:分子互作仪(温度控制0.1℃)
6.JEOLJEM-ARM300F:冷冻透射电镜(加速电压300kV)
7.PerkinElmerEnVision:多功能酶标仪(波长范围230-1000nm)
8.BeckmanOptimaXPN-100:超速离心机(最大转速100,000rpm)
9.WatersACQUITYUPLCH-Class:超高效液相色谱(耐压15,000psi)
10.OlympusIX83:全内反射荧光显微镜(TIRF模式NA1.49)