检测项目
1.葡萄糖-6-磷酸(G6P)浓度测定:定量范围0.1-10mmol/L,误差2%
2.6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD)活性:单位定义μmolNADPH/(minmgprotein),检测限0.5U/gHb
3.NADPH生成速率:动态监测340nm吸光度变化,时间分辨率0.1s
4.核酮糖-5-磷酸异构酶活性:比色法测定550nm显色强度,线性范围0.05-2.0U/mL
5.转酮醇酶活性分析:采用HPLC-MS联用技术,定量下限0.01nmol/(minmg)
检测范围
1.临床样本:全血、血清、红细胞裂解液
2.细胞培养物:哺乳动物细胞系、原代肝细胞、肿瘤细胞模型
3.药品制剂:抗疟疾药物前体、化疗辅助剂原料药
4.食品添加剂:异抗坏血酸钠、D-核糖生产中间体
5.工业微生物:酿酒酵母工程菌、谷氨酸棒状杆菌发酵液
检测方法
1.ASTME2469-16:分光光度法测定G6PD活性标准流程
2.ISO15193:2009:临床酶学参考测量程序规范
3.GB/T37870-2019:生物样品中磷酸戊糖浓度测定液相色谱法
4.GB5009.257-2016:食品中NADPH含量的高效毛细管电泳法
5.CLSIEP05-A3:酶活性测定精密度验证方案
检测设备
1.ThermoScientificGenesys150UV-Vis分光光度计:波长范围190-1100nm,带宽1nm
2.Agilent1260InfinityIIHPLC系统:配备DAD检测器及ZORBAXEclipsePlusC18色谱柱
3.WatersXevoTQ-Smicro三重四极杆质谱仪:质量范围5-2000m/z,ESI离子源
4.BeckmanCoulterAU5800全自动生化分析仪:处理量2400测试/小时,恒温精度0.1℃
5.EppendorfBioSpectrometerkinetic:温控比色皿支架,支持动力学模式连续监测
6.PerkinElmerEnSpire多模式读板机:可同步进行荧光/化学发光/时间分辨荧光检测
7.Metrohm940ProfessionalICVario离子色谱仪:抑制型电导检测器,检出限0.1ppb
8.SartoriusCubisMSA225S-1CE分析天平:量程220g,可读性0.01mg
9.MemmertINCOmed细胞培养箱:CO₂控制精度0.1%,温度均匀性0.3K
10.Eppendorf5430R高速冷冻离心机:最大转速30,000rpm,温控范围-20℃至40℃