检测项目
1.抗卵巢IgG抗体定量检测:采用ELISA法测定血清样本中IgG型抗卵巢抗体浓度(0-150IU/mL)
2.抗卵巢IgM抗体半定量分析:通过间接免疫荧光法测定临界滴度≥1:32为阳性
3.抗透明带抗体特异性检测:化学发光法测定特异性结合率>15%判定为异常
4.抗颗粒细胞膜抗体筛查:流式细胞术检测CD99+细胞结合率>5%为阳性阈值
5.抗黄体生成素受体抗体检测:放射免疫法测定结合抑制率≥30%为临床阳性标准
检测范围
1.人血清样本:需采集晨起空腹静脉血3mL(EDTA抗凝管)
2.卵泡液样本:经阴道穿刺获取的成熟卵泡液(≥1mL)
3.细胞培养上清液:卵巢颗粒细胞体外培养72小时后的培养基
4.腹腔积液样本:经腹腔穿刺术获取的病理积液(无菌管保存)
5.冻存组织匀浆液:卵巢活检组织经液氮速冻后的PBS匀浆提取物
检测方法
1.ELISA法:依据ISO15189:2012医学实验室质量和能力要求建立标准曲线
2.化学发光免疫分析法:参照GB/T26124-2011化学发光免疫分析试剂盒标准
3.间接免疫荧光法:执行WS/T360-2011流式细胞术临床应用指南
4.放射免疫沉淀试验:符合ASTME3066-16放射性标记免疫测定标准规范
5.蛋白印迹法验证:依据GB/T27417-2017合格评定化学分析方法验证程序
检测设备
1.ThermoFisherMultiskanFC酶标仪:用于ELISA法光密度值读取(波长450nm/630nm)
2.RocheCobase601化学发光分析仪:全自动完成抗原抗体复合物信号放大与检测
3.BDFACSCantoII流式细胞仪:配备488nm/640nm双激光系统进行细胞表面标记分析
4.PerkinElmerWizard2γ计数器:测量放射免疫试验中125I标记物的γ射线强度
5.Bio-RadChemiDocMP成像系统:WesternBlot化学发光信号采集与分析
6.EppendorfCentrifuge5430R:低温高速离心机(最大转速15,000rpm)用于样本预处理
7.SartoriusQuintix224-1CN电子天平:精确称量试剂(精度0.1mg)
8.MemmertINCO153细胞培养箱:维持37℃/5%CO₂环境进行细胞培养
9.ThermoScientificArktikPCR仪:用于分子生物学对照实验的温度循环控制
10.MettlerToledoSevenExcellencepH计:校准缓冲液pH值(测量精度0.01)