转录作用检测

检测项目

1.RNA聚合酶活性测定：酶活单位(U/mg)、反应时间(15-60min)、温度梯度(25-42℃)

2.模板DNA完整性分析：琼脂糖凝胶电泳(0.8%浓度)、片段长度(200-5000bp)、OD260/280比值(1.8-2.0)

3.转录产物纯度检测：蛋白质残留量(≤0.1μg/μl)、dsRNA含量(≤5%)、内毒素水平(<0.25EU/μg)

4.RNA定量分析：浓度测定(ng/μl)、完整性指数(RIN≥7.0)、二级结构稳定性(Tm值0.5℃)

5.终止效率验证：终止子识别率(≥98%)、非特异性延伸产物(≤2%)、残留核苷酸清除率(≥99.9%)

检测范围

1.生物样本：细胞裂解液、线粒体提取物、病毒载体溶液

2.药品原料：mRNA疫苗原液、siRNA治疗剂中间体、反义核酸原料

3.基因工程产品：重组质粒DNA、体外转录试剂盒、CRISPR引导RNA

4.诊断试剂：RT-PCR探针组、Northernblot标记探针、微阵列芯片RNA样本

5.科研材料：体外翻译系统组分、核糖核酸酶抑制剂、修饰核苷酸类似物

检测方法

1.ISO18184:2019《体外转录系统病毒灭活验证规程》

2.ASTME3134-18《核酸体外合成产物纯度测定标准方法》

3.GB/T34797-2017《RNA浓度测定分光光度法》

4.ISO20395:2019《生物技术-核酸定量测定的技术要求》

5.GB/T37873-2019《生物样品中RNA完整性检测通则》

检测设备

1.Agilent4200TapeStation系统：执行RNA完整性数值(RIN)分析，分辨率达1bp

2.ThermoFisherNanoDrop2000：微量核酸浓度测定，检测范围2-3700ng/μl

3.Bio-RadCFX96实时定量PCR仪：进行RT-qPCR定量分析，灵敏度达单拷贝级别

4.MalvernZetasizerNanoZSP：动态光散射测定纳米颗粒粒径(0.3nm-10μm)

5.EppendorfMastercyclerX50：温控精度0.1℃的梯度PCR系统

6.BeckmanCoulterAU5800：全自动生化分析仪，通量2000测试/小时

7.WatersACQUITYUPLCH-Class：超高效液相色谱仪，色谱柱温度控制0.5℃

8.IlluminaNovaSeq6000：高通量测序平台，单次运行产出6Tb数据

9.OlympusBX53荧光显微镜：配备DP80双摄像头系统，分辨率24482048像素

10.SartoriusQuintix224-1CN：万分之一天平，重复性≤0.1mg

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"转录作用检测"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检检测技术研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。