检测项目

1.血浆游离胱氨酸浓度测定：采用高效液相色谱法（HPLC），参考范围＜30μmol/L

2.尿胱氨酸/肌酐比值：离子交换色谱法检测，临界值＞60mg/gCr

3.溶酶体胱氨酸含量测定：白细胞亚细胞组分分析，阈值＜0.2nmol半胱氨酸/mg蛋白

4.CTNS基因全外显子测序：覆盖7q21.3区域17个外显子

5.角膜胱氨酸结晶分级：共聚焦显微镜下按0-IV级分类系统评估

检测范围

1.全血样本：EDTA抗凝外周血用于基因检测及白细胞分离

2.24小时尿液：收集容器需含6NHCl防腐剂

3.皮肤成纤维细胞：原代培养用于溶酶体功能研究

4.羊水细胞：孕16-20周产前诊断样本

5.干血斑：新生儿筛查专用滤纸卡采集

检测方法

1.ISO15189:2012《医学实验室质量和能力要求》

2.CLSIEP28-A3C《临床实验室定量测量程序验证》

3.GB/T37864-2019《生物样本库质量和能力通用要求》

4.ASTME3066-16《基因测序数据分析标准指南》

5.WS/T420-2013《临床实验室检验项目参考区间的制定》

检测设备

1.Agilent1260InfinityIIHPLC系统：配备荧光检测器（Ex338nm/Em425nm）

2.ThermoScientificQExactiveHF质谱仪：分辨率达240,000FWHM

3.IlluminaNovaSeq6000测序仪：通量6Tb/run，读长2150bp

4.ZeissLSM980共聚焦显微镜：405nm激光激发胱氨酸结晶自发荧光

5.BeckmanCoulterAU5800生化分析仪：酶比色法测定肌酐浓度

6.EppendorfCellImagingMultimodeReader：微孔板法测定溶酶体pH值

7.MiltenyiBiotecGentleMACS组织解离器：标准化处理皮肤活检样本

8.Bio-RadD-10糖化血红蛋白分析仪：改良用于胱氨酸结合蛋白检测

9.PerkinElmerJANUSG3工作站：自动化核酸提取与PCR体系构建

10.RocheLightCycler480II实时定量PCR仪：CTNS基因拷贝数变异分析