检测项目
1.登革病毒NS1抗原检测:采用ELISA法测定血清样本中非结构蛋白NS1抗原浓度(灵敏度≥95%)
2.寨卡病毒IgM/IgG抗体检测:免疫荧光法测定抗体效价(效价≥1:320判为阳性)
3.基孔肯雅病毒核酸检测:实时荧光RT-PCR法测定E1基因序列(Ct值≤38)
4.黄热病毒中和抗体效价测定:空斑减少中和试验(PRNT90≥1:10为阳性)
5.西尼罗病毒分离培养:Vero细胞系培养观察细胞病变效应(CPE)
检测范围
1.临床样本:急性期患者血清(采集时间≤7天)、脑脊液
2.媒介生物:伊蚊(Aedesspp.)、库蚊(Culexspp.)成蚊及幼虫
3.病理组织:尸检肝脾组织(福尔马林固定/石蜡包埋)
4.环境样本:孳生地水体(500ml/份)、土壤表层样本
5.生物制品:疫苗生产用Vero细胞基质、血浆制品原料
检测方法
1.ISO15189:2012《医学实验室质量和能力要求》血清学检测规范
2.ASTME2276-18《蚊媒病毒核酸检测标准指南》
3.GB/T30989-2014《蚊媒传染病病原体检测通用指南》
4.GB19489-2008《实验室生物安全通用要求》病毒分离操作规范
5.WHO《登革热诊断、治疗与防控指南》(2019版)病例确诊标准
检测设备
1.ABI7500实时荧光定量PCR仪:用于病毒核酸绝对定量分析(动态范围4-10log)
2.BioTekSynergyH1酶标仪:支持ELISA/IFA多模式光学检测(波长范围200-999nm)
3.ThermoHeracell150iCO2培养箱:三级生物安全型细胞培养系统(温度控制0.1℃)
4.JEOLJEM-1400透射电镜:负染法观察病毒颗粒形态(分辨率0.38nm)
5.BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪:淋巴细胞亚群分析(3激光13色配置)
6.MiltenyiBiotecGentleMACS组织匀浆器:生物安全柜内自动化样本前处理
7.EppendorfCentrifuge5910R高速离心机:最大RCF30,130g(适配生物安全转头)
8.HamiltonSTARlet全自动液体工作站:核酸提取通量96样本/批次
9.LeicaCM1950冷冻切片机:病理组织样本制备(切片厚度1-50μm可调)
10.SartoriusCubisII精密天平:称量精度0.01mg(符合GLP规范)