检测项目

1.FBN1基因全外显子测序：覆盖65个外显子区域（NM_000138.4），测序深度≥100

2.TGFBR2基因热点突变检测：包含c.1141G>A（p.Gly381Arg）等12个已知致病位点

3.血清原纤维蛋白-1定量：采用ELISA法（参考区间：18-32μg/L）

4.尿吡啶啉/脱氧吡啶啉比值测定：HPLC-MS/MS法（临界值＞5.2nmol/mmolCr）

5.主动脉根部Z值计算：超声心动图测量（年龄标准化直径偏差值≥2.0为异常）

检测范围

1.外周血全基因组DNA样本（采集量≥2mLEDTA抗凝血）

2.皮肤成纤维细胞培养物（传代次数≤P5）

3.主动脉组织病理切片（苏木精-伊红/Verhoeff-VanGieson染色）

4.晶状体悬韧带显微结构标本（扫描电镜制备样本）

5.关节滑液生化组分（透明质酸浓度≥3.5g/L需复检）

检测方法

1.二代测序：ISO/IEC17025:2017认证的IlluminaNovaSeq6000平台

2.Sanger验证：ABI3500xL测序仪（GB/T30988-2014标准）

3.蛋白质印迹法：Bio-RadChemiDocMP系统（参照WS/T420-2013规范）

4.液相色谱串联质谱：WatersXevoTQ-Smicro（ISO15193:2009标准）

5.三维超声成像：GEVividE95（遵循ASE/EACVI2015指南）

检测设备

1.IlluminaNovaSeq6000：高通量测序系统（通量20-48Tb/run）

2.ABIQuantStudio7Flex：实时荧光定量PCR仪（检测灵敏度0.1%）

3.Agilent2100Bioanalyzer：DNA/RNA完整性评估（DV200＞80%）

4.RocheCobasc501：全自动生化分析仪（精密度CV＜1.5%）

5.LeicaCM1950：恒冷切片机（切片厚度3-5μm精度控制）

6.ZeissAxioImager.M2：荧光显微镜（40油镜NA=1.3）

7.EppendorfCentrifuge5430R：高速冷冻离心机（max30,000g）

8.ThermoScientificMultiskanSkyHigh：全波长酶标仪（OD值范围0-4.0）

9.SiemensADVIACentaurXP：化学发光免疫分析仪（检测线性＞5logs）

10.Hitachi7600-210：全自动电泳仪（分辨率0.5mm）