检测项目
1.乙醛酸含量测定:采用HPLC法测定浓度范围0.1-100μmol/L,RSD≤2.5%
2.异柠檬酸裂解酶活性:催化反应速率测定(单位U/mg),线性范围0.05-5.0U/mL
3.苹果酸合成酶活性:NADPH氧化速率法检测灵敏度0.01U/mg
4.琥珀酸脱氢酶活力:比色法测定吸光度变化(波长600nm)
5.辅酶A含量分析:荧光法检测限0.05nmol/mg蛋白
检测范围
1.微生物发酵液样本(大肠杆菌、酵母菌等)
2.植物组织提取物(油料作物种子、叶片等)
3.哺乳动物细胞培养液(肝细胞系HepG2等)
4.工业级酶制剂产品(纯度≥90%)
5.医药中间体原料(批次量≥500g)
检测方法
ASTME2469-16分光光度法测定脱氢酶活性
ISO17025:2017实验室质控规范
GB/T35809-2018生物制品中辅酶含量测定
GB5009.257-2016食品中有机酸测定液相色谱法
ISO21571:2013分子生物学检测通则
检测设备
Agilent1260InfinityIIHPLC系统:配备DAD检测器,用于有机酸定量分析
ThermoScientificNanoDropOne分光光度计:波长范围190-850nm,酶活快速测定
SartoriusCubisII分析天平:称量精度0.0001g,微量样品称量
EppendorfMastercyclerPCR仪:温度精度0.1℃,用于基因表达分析
BeckmanCoulterDTX880微孔板读数仪:多波长同步检测酶动力学参数
WatersXevoTQ-S质谱仪:MRM模式定量代谢物分子量50-2000Da
Bio-RadChemiDocMP成像系统:化学发光法蛋白印迹定量分析
SiemensADVIA2400生化分析仪:自动化处理200测试/小时通量