检测项目
1.酶活性测定:以1,3-丁二醇为底物,测定340nm处NADH吸光度变化率(单位:U/mg)
2.底物特异性分析:测试C4-C6二元醇类物质的催化转化效率(Km值范围:0.5-3.0mM)
3.pH稳定性测试:评估pH5.0-9.0范围内酶活保留率(37℃孵育1h)
4.热稳定性分析:测定50-70℃热处理30min后的残余活性
5.金属离子影响试验:考察Ca⁺/Mg⁺/Zn⁺(浓度梯度0.1-10mM)对酶活的影响
检测范围
1.工业级丁二醇脱氢酶制剂(纯度≥90%)
2.生物医药中间体合成用重组BDH
3.食品级固定化BDH催化剂
4.环境监测用BDH生物传感器核心元件
5.科研用突变体BDH蛋白样品
检测方法
ASTME2313-20《生物催化剂活性测定标准规程》第7.4节
ISO18117:2018《表面化学分析-生物酶活性测量方法》
GB/T23535-2009《脱氢酶制剂活力测定通用方法》
GB4789.43-2016《食品微生物学检验酶活性测定》附录B
JISK3821:2020《工业用脱氢酶分析方法》第Ⅲ类
检测设备
ThermoScientificGenesys150UV-Vis分光光度计(波长精度0.5nm)
Agilent1260InfinityIIHPLC系统(配备ZORBAXSB-C18色谱柱)
EppendorfMastercyclerX50梯度PCR仪(温控精度0.1℃)
MalvernZetasizerNanoZSP动态光散射仪(粒径测量范围0.3nm-10μm)
SartoriusCubisMSA225S微量天平(分辨率0.001mg)
MemmertINB500恒温培养箱(温度均匀性0.3℃)
Bio-RadModel680微孔板读板机(支持双波长同步检测)
BeckmanCoulterOptimaXPN-100超速离心机(最大RCF1,000,000g)