检测项目

1.酰基载体蛋白浓度测定：采用紫外分光光度法（波长280nm），灵敏度≥0.1mg/mL

2.酰基化修饰位点分析：通过质谱法鉴定Cys/Ser残基修饰率（分辨率≤1ppm）

3.热稳定性测试：差示扫描量热法（DSC）测定Tm值（温度范围20-120℃）

4.结合能力评估：等温滴定量热法（ITC）测定解离常数Kd（精度5%）

5.氧化还原状态检测：Ellman法测定游离巯基含量（线性范围0.05-2mM）

检测范围

1.重组表达系统：大肠杆菌/酵母表达的重组酰基载体蛋白

2.生物制药中间体：疫苗佐剂用硫酯酶复合物

3.食品添加剂：乳制品中天然酰基化乳清蛋白

4.临床样本：血清中脂肪酸结合蛋白异构体

5.工业酶制剂：脂肪酶固定化载体蛋白基质

检测方法

ISO21572:2019《食品中蛋白质检测通用方法》

ASTME2694-21《热分析用差示扫描量热法标准指南》

GB/T22244-2008《保健食品中蛋白质的测定》

USP<1052>生物技术产品表征分析方法验证

ChP2020四部通则0541质谱法指导原则

检测设备

Agilent1260InfinityIIHPLC系统：配备DAD检测器（波长范围190-950nm）

ThermoScientificQExactiveHF-X质谱仪：Orbitrap分辨率达240,000@m/z200

MalvernMicroCalPEAQ-ITC：温度控制精度0.02℃

ShimadzuUV-2600i分光光度计：带宽1nm，波长精度0.3nm

TAInstrumentsDSC250：温度扫描速率0.1-100℃/min

JascoJ-1500圆二色光谱仪：波长范围163-900nm

Bio-RadChemiDocMP成像系统：CCD像素130万，动态范围4OD

EppendorfCentrifuge5430R：最大转速30,000rpm（RCF64,400xg）

Cytation5细胞成像微孔板检测系统：支持荧光/发光/吸光度多模式检测

NanoDropOne超微量分光光度计：样品体积需求0.3-2μL