检测项目

1.曲霉菌培养与鉴定：采用沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA），培养温度28℃2℃，观察菌落形态（绒毛状至颗粒状）及分生孢子结构（单层瓶梗），鉴定周期5-7天。

2.半乳甘露聚糖抗原检测（GM试验）：血清/肺泡灌洗液样本，酶联免疫吸附法（ELISA），临界值≥0.5OD指数（血清）或≥1.0OD指数（BALF），灵敏度82%-88%。

3.β-D-葡聚糖检测（G试验）：动态比浊法测定真菌细胞壁成分，血清样本阈值≥80pg/mL，排除细菌感染干扰。

4.曲霉菌PCR检测：实时荧光定量PCR扩增18SrRNA/ITS区域，引物序列Asper-F:5'-GGCGGCCAGTAGTCATATGCT-3'，检出限≤10copies/μL。

5.组织病理学检查：HE染色显示45分支分隔菌丝（直径3-6μm），PAS染色增强菌丝显色对比度。

检测范围

1.临床样本：血清（无菌采血管收集3-5mL）、肺泡灌洗液（BALF需过滤离心浓缩）

2.肺组织活检标本：经皮穿刺或手术切除组织块（福尔马林固定/冷冻保存）

3.呼吸道分泌物：深部痰液（液化处理采用N-乙酰-L-半胱氨酸）

4.环境监测样本：空气采样器收集的浮游菌（安德森六级撞击式采样器）

5.药品无菌测试：注射用两性霉素B等抗真菌药物生产环境监测

检测方法

1.微生物培养法：参照CLSIM38-A2《丝状真菌药敏试验参考方法》

2.GM抗原检测：执行欧洲癌症研究与治疗组织/真菌病研究组（EORTC/MSG）标准

3.PCR扩增：依据ISO16256:2012《抗微生物敏感性试验的参考方法》

4.组织病理学诊断：符合WHO《侵袭性真菌病病理诊断指南》2018版

5.β-D-葡聚糖测定：采用GB/T38503-2020《真菌β-葡聚糖测定》光度法

检测设备

1.VITEK2Compact全自动微生物鉴定系统：基于比色法卡匣（ID-YST卡）完成酵母样菌鉴定

2.ABI7500实时荧光定量PCR仪：TaqMan探针法实现DNA定量分析

3.BioTekELx808酶标仪：波长450nm/630nm双通道读取GM试验OD值

4.OlympusBX53荧光显微镜：配备DP80双摄像头系统观察荧光标记抗原

5.Eppendorf5430R高速冷冻离心机：最大转速30,000rpm处理BALF样本

6.ThermoScientificHeracell150iCO₂培养箱：三气环境控制（5%CO₂,37℃恒温）

7.SartoriusMD8空气采样器：孔径0.45μm滤膜采集环境曲霉菌孢子

8.LeicaCM1950冰冻切片机：-20℃条件下制备组织病理切片

9.MalvernMastersizer3000激光粒度仪：分析气溶胶中孢子粒径分布（1-10μm）

10.BDBACTECFX40血培养系统：持续监测血液样本中真菌生长代谢信号