检测项目

1.基因位点覆盖度：SNP分型准确率≥99.9%，最低检出限0.1%突变频率

2.等位基因比例偏差：相对偏差≤5%（浓度范围1-1000copies/μL）

3.杂合性丢失（LOH）频率：分辨率达1:1000杂合/纯合比例

4.引物二聚体干扰：熔解曲线Tm值偏差≤0.5℃

5.非特异性扩增率：阴性对照Ct值≥35循环数

检测范围

1.外周血样本：EDTA抗凝全血DNA浓度≥5ng/μL

2.肿瘤组织切片：石蜡包埋样本DNA片段≥200bp

3.FFPE样本：交联DNA修复成功率≥85%

4.细胞系培养物：传代次数≤20代的稳定基因组

5.微生物混合群落：16SrRNA基因V3-V4区扩增效率≥90%

检测方法

1.荧光定量PCR：ISO17025:2017体系验证，退火温度梯度2℃验证特异性

2.Sanger测序：GB/T30989-2014双向测序覆盖率≥98%

3.NGS文库构建：IlluminaTruSeqNanoDNAprotocol（350-550bp插入片段）

4.数字PCR分析：基于QX200™的微滴分割技术（20,000droplets/样本）

5.HRM分型：LightCycler480II高分辨率模式（0.01℃/s升温速率）

检测设备

1.IlluminaNovaSeq6000：双通道SBS测序技术，通量6Tb/run

2.ThermoFisherQuantStudio7Pro：六色荧光通道，温控精度0.1℃

3.Bio-RadQX200DropletDigitalPCR：微滴生成效率98%，CV值＜5%

4.Agilent4200TapeStation：DNA完整性DIN值测定范围1-10

5.BeckmanCoulterBiomeki7：移液精度CV≤1%（1-1000μL）

6.RocheLightCycler480II：384孔板HRM分析分辨率0.001ΔF

7.EppendorfMastercyclerX50s：梯度PCR温度均匀性0.3℃

8.QiagenQIAcubeHT：核酸提取通量96样本/批次，回收率≥90%

9.PerkinElmerLabChipGXTouch：DNA浓度测定精度5%（0.5-200ng/μL）

10.SartoriusCubisIIMSA：天平称量精度0.01mg（最大量程220g）