检测项目
1.鞘翅刻点密度:测量每平方毫米刻点数量(15-22个/mm),观察纵向排列规律性
2.触角长度比:计算第3-11节触角长度与基节长度的比值(1:1.2-1.8)
3.前胸背板宽长比:测定最大宽度与中纵线长度比例(1.35-1.65:1)
4.COI基因序列:扩增658bp线粒体细胞色素氧化酶亚基I片段
5.后足胫节端距:测量端部刺状突长度(0.25-0.35mm)及弯曲角度(35-45)
检测范围
1.农作物样本:水稻、小麦、玉米叶片受害状标本
2.林业植物材料:栎属、榆属树木枝条蛀孔样本
3.进出口检疫样品:木质包装材料截获成虫标本
4.仓储农产品:干制中药材虫蛀残留物
5.实验室培养样本:人工饲养的幼虫蜕皮壳及成虫标本
检测方法
ISO21571:2005分子生物学检测规范(DNA提取与PCR扩增)
GB/T18085-2021植物检疫昆虫鉴定规程(形态学鉴定)
ASTME2455-22昆虫标本显微成像技术标准
GB/T35348-2017仓储害虫抗药性测定方法
ISO21702:2019昆虫线粒体基因组测序技术规范
检测设备
LeicaM205C体视显微镜:配备DFC450数码相机,实现80三维成像观察
ThermoNanoDropOne紫外分光光度计:检测DNA纯度(A260/A280≥1.8)
Bio-RadT100PCR仪:执行COI基因扩增程序(退火温度52℃0.5℃)
HitachiSU3500扫描电镜:观测鞘翅微结构(加速电压5kV,WD10mm)
Agilent4200TapeStation系统:进行DNA片段分析(灵敏度0.1ng/μL)
OlympusBX53微分干涉显微镜:测量体表刚毛密度(400油镜观测)
EppendorfCentrifuge5430R:完成DNA提取离心(最大转速15,300g)
KeyenceVHX-7000超景深显微镜:三维重建口器结构(500连续变倍)
IlluminaMiSeq测序平台:开展全基因组测序(PE250读长模式)
SartoriusCP225D电子天平:称量虫体质量(精度0.01mg)