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磷酸甘油酸变位酶检测

  • 原创官网
  • 2025-05-20 18:59:20
  • 关键字:磷酸甘油酸变位酶测试范围,磷酸甘油酸变位酶测试案例,磷酸甘油酸变位酶测试方法
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磷酸甘油酸变位酶检测概述:检测项目1.酶活性测定:单位时间内NADH氧化速率(U/mg蛋白),测定波长340nm2.比活力计算:基于Bradford法测定总蛋白浓度(mg/mL),计算比活力(U/mg)3.最适pH范围:采用Tris-HCl缓冲体系(pH6.0-8.5),间隔0.5单位梯度测试4.温度稳定性:30-50℃恒温处理30min后残余活性测定(%)5.米氏常数(Km)测定:底物3-磷酸甘油酸浓度梯度0.1-5.0mM下的动力学分析检测范围1.重组表达体系:大肠杆菌/酵母表达的重组PGAM蛋白制剂2.临床样本:肿瘤组织匀浆


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检测项目

1.酶活性测定:单位时间内NADH氧化速率(U/mg蛋白),测定波长340nm

2.比活力计算:基于Bradford法测定总蛋白浓度(mg/mL),计算比活力(U/mg)

3.最适pH范围:采用Tris-HCl缓冲体系(pH6.0-8.5),间隔0.5单位梯度测试

4.温度稳定性:30-50℃恒温处理30min后残余活性测定(%)

5.米氏常数(Km)测定:底物3-磷酸甘油酸浓度梯度0.1-5.0mM下的动力学分析

检测范围

1.重组表达体系:大肠杆菌/酵母表达的重组PGAM蛋白制剂

2.临床样本:肿瘤组织匀浆液中的PGAM同工酶分型

3.诊断试剂盒:PGAM活性检测试剂盒的质控验证

4.食品工业用酶:微生物发酵生产的PGAM粗酶制剂

5.药物研发:PGAM抑制剂筛选实验中的酶源样品

检测方法

ISO15193:2009《体外诊断医疗器械-生物源性样品中量的测量-参考测量程序的表述》

GB/T37861-2019《生物样品中酶活性测定通用方法》

ASTME2935-17《StandardGuideforEnzymeActivityAssays》

CLSIEP05-A3《EvaluationofPrecisionofQuantitativeMeasurementProcedures》

JPXVIIGeneralTests2.63《EnzymeImmunoassayMethods》

检测设备

ThermoScientificGenesys150UV-Vis分光光度计:波长精度0.5nm,带宽1nm

Agilent1260InfinityIIHPLC系统:配备ZORBAXSB-C18色谱柱(4.6150mm,5μm)

EppendorfMastercyclerX50PCR仪:温度精度0.1℃,支持梯度PCR程序

BeckmanCoulterOptimaXPN-100超速离心机:最大转速100,000rpm,温控范围0-40℃

SartoriusCubisMSA225S分析天平:称量精度0.01mg/0.001mg双量程模式

Bio-RadModel680MicroplateReader:支持动力学模式读取(间隔10s)

MettlerToledoSevenExcellencepH计:分辨率0.001pH,自动温度补偿功能

MemmertINCOmed恒温培养箱:温度均匀性0.3℃,湿度控制范围10-90%RH

MalvernZetasizerNanoZSP动态光散射仪:粒径测量范围0.3nm-10μm

CytivaKTApure蛋白纯化系统:在线UV280/电导率/pH多参数监测模块

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

  以上是与磷酸甘油酸变位酶检测相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

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