检测项目

1.第因子活性测定（FVIII:C/FIX:C）：采用一期法或发色底物法测定凝血活性百分比（参考区间50-150%）

2.第因子抗原含量（FVIII:Ag/FIX:Ag）：ELISA法定量检测抗原水平（灵敏度≤0.5IU/dL）

3.抑制物筛查（Bethesda法）：定量测定中和抗体效价（分辨率≥0.6BU/mL）

4.基因突变分析：PCR扩增F8/F9基因外显子（覆盖外显子14/26热点区域）

5.交叉纠正试验：混合血浆APTT纠正实验（孵育时间1205min）

检测范围

1.临床样本：枸橼酸钠抗凝全血（采血管规格3.2%浓度）

2.质控物质：WHO标准品NIBSC07/316（FVIII）与NIBSC11/236（FIX）

3.诊断试剂：凝血酶原时间复合试剂（含缺因子血浆）

4.冻干制品：重组凝血因子浓缩制剂（热稳定性测试样本）

5.基因检测材料：EDTA抗凝全血（DNA浓度≥20ng/μL）

检测方法

1.ISO17593:2007《凝血因子VIII活性测定-发色底物法》

2.CLSIH59-A《凝血因子IX活性一期法测定指南》

3.GB/T39134-2020《纤维蛋白原、凝血因子活性测定技术规范》

4.ASTMF2385-04(2019)《医用塑料制品凝血因子吸附性测试》

5.WS/T359-2011《血浆凝固实验血液标本采集与处理指南》

检测设备

1.STAGOSTA-REvolution全自动凝血分析仪（光学磁珠法原理）

2.SiemensBCSXPSystem凝血测试系统（机械终点检测法）

3.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪（TaqMan探针法）

4.Bio-RadModel680酶标仪（双波长450/630nm测量）

5.EppendorfCentrifuge5430R低温离心机（最大RCF30,130g）

6.BeckmanCoulterAU5800生化分析仪（比浊法抗干扰模块）

7.IlluminaMiSeqDx基因测序仪（2150bp读长模式）

8.SysmexCS-5100凝血分析仪（多波长凝固时间监测）

9.Agilent4200TapeStation核酸分析系统（DNA完整性评估）

10.MemmertINCOmed细胞培养箱（温度波动0.3℃）