检测项目

1.蛋白浓度测定：采用BCA法（灵敏度0.5μg/mL）和紫外分光光度法（A280/A260比值分析）

2.酶活性分析：ATP酶活性（单位：μmol/min/mg）、蛋白酶K比活力（FITC-casein底物法）

3.热稳定性测试：差示扫描量热法（DSC）测定Tm值（精度0.1℃）

4.二级结构鉴定：圆二色光谱（190-260nm扫描）α-螺旋含量测定

5.翻译后修饰检测：磷酸化位点质谱鉴定（分辨率≥70,000）、糖基化HILIC-UPLC分析

检测范围

1.重组治疗性蛋白：单克隆抗体（IgG1/IgG4）、融合蛋白（TNF受体-Fc段）

2.疫苗原液：HPVL1病毒样颗粒、新冠S蛋白亚单位疫苗

3.细胞治疗制品：CAR-T细胞培养上清中IL-6/IFN-γ因子

4.诊断试剂核心组分：ELISA包被抗原、化学发光标记抗体

5.生物材料涂层：胶原蛋白支架交联度（EDC/NHS法处理样品）

检测方法

ASTME2694-21《重组蛋白纯度测定规程》规定SEC-HPLC柱效要求

ISO21348:2020《生物制品活性蛋白质控指南》酶活性测试规范

GB/T33410-2016《生物样品中蛋白质定量考马斯亮蓝法》

GB/T38165-2019《治疗用抗体效价测定ELISA法》抗原结合活性标准

EP2.6.34《欧洲药典》毛细管电泳法测定蛋白电荷异质性

检测设备

1.Agilent1260InfinityIIHPLC系统：配备BioSEC-5色谱柱（5μm,150），用于分子量分布分析

2.MalvernZetasizerPro纳米粒度仪：动态光散射模式测定蛋白聚集度（0.3nm-10μm）

3.ThermoOrbitrapExploris480质谱仪：ESI源配合HCD碎裂，实现完整分子量（MW1Da）测定

4.PerkinElmerLambda365紫外分光光度计：双光束系统支持1μL微量比色皿检测

5.BeckmanPA800Plus毛细管电泳仪：中性涂层毛细管（50μm30cm）进行等电聚焦分析

6.WatersACQUITYUPLCH-Class系统：BEH300C4色谱柱（1.7μm）完成疏水相互作用分离

7.JascoJ-1500圆二色光谱仪：温控单元支持5-95℃变性曲线实时监测

8.BioTekSynergyH1酶标仪：具备荧光偏振功能（485/528nm），支持384孔板高通量检测