检测项目
1.DNA印迹杂交(SouthernBlot):基因组DNA片段分析(0.5-50kb),探针浓度≥20ng/mL
2.RNA印迹杂交(NorthernBlot):mRNA表达量检测(0.1-10kb),上样量10-30μg总RNA
3.蛋白质印迹(WesternBlot):目标蛋白特异性识别(10-200kDa),一抗稀释比1:500-1:5000
4.斑点杂交(DotBlot):核酸/蛋白半定量分析(0.1-5μg点样量)
5.菌落原位杂交:重组克隆筛选(菌落密度100-200CFU/cm)
检测范围
1.生物组织样本:动植物组织切片/匀浆液(保存于RNAlater或液氮)
2.细胞培养物:贴壁/悬浮细胞裂解液(浓度≥110⁶cells/mL)
3.血液制品:全血/血清/血浆样本(EDTA抗凝处理)
4.微生物样本:细菌/真菌/病毒核酸提取物(OD260/280=1.8-2.0)
5.法医物证:毛发/唾液斑痕等微量DNA样本(≥0.1ng/μL)
检测方法
ISO22174:2005分子生物学分析用核酸提取通用要求
GB/T34796-2017核酸分子杂交技术规范
ASTME2149-20膜载体结合效率测试标准方法
ISO10993-5:2009生物材料体外细胞毒性评价
GB/T37873-2019生物样品中蛋白质免疫印迹法检测通则
检测设备
Bio-RadChemiDocMP凝胶成像系统:化学发光/荧光信号采集(分辨率20482048)
ThermoScientificPierceECL化学发光仪:HRP底物显影(灵敏度≤1pg)
GEHealthcareAmershamHybond-N+尼龙膜:核酸结合能力≥400ng/cm
Bio-RadPowerPacBasic电泳仪:电压范围10-300V(恒压/恒流模式)
SartoriusQuintix224-1CN分析天平:称量精度0.1mg(Max220g)
EppendorfThermoMixerC混匀仪:温控范围-10C~100C(转速300-1400rpm)
ThermoScientificNanoDropOne紫外分光光度计:核酸定量(波长260/280nm)
MemmertCO₂培养箱:温控精度0.1C(湿度范围30-95%)
BeckmanCoulterAllegraX-15R离心机:最大RCF21,130g(容量685mL)
MilliporeMilli-QIQ7000超纯水系统:电阻率18.2MΩcm@25C