检测项目
1.酶活性测定:单位时间内分解H₂O₂的摩尔数(U/mg蛋白)
2.比活性计算:总活性与蛋白浓度的比值(U/mg)
3.Km值测定:米氏常数测定范围0.1-50mMH₂O₂
4.最适pH范围:pH5.0-9.0梯度测试
5.温度稳定性:25-60℃热失活曲线分析
检测范围
1.哺乳动物肝组织匀浆液(大鼠/小鼠/人源)
2.重组酶制剂(大肠杆菌/酵母表达系统)
3.食品添加剂中抗氧化酶活性评估
4.环境污染物暴露下的细胞裂解液
5.临床血清/血浆样本氧化应激标志物检测
检测方法
1.ISO23714:2016《生物技术-酶活性测定通用指南》
2.GB/T33419-2016《生化试剂中过氧化氢酶活力测定》
3.ASTME2694-21《分光光度法测定过氧化物酶活性》
4.GB5009.257-2016《食品中过氧化氢酶的测定》
5.ISO10993-18:2020《医疗器械生物学评价-降解产物定量分析》
检测设备
1.ThermoScientificGenesys150UV-Vis分光光度计:240nm波长H₂O₂吸光度监测
2.HitachiF-7100荧光分光光度计:AmplexRed探针法测定过氧化物酶活性
3.Agilent1260InfinityIIHPLC系统:酶反应产物定量分析
4.MalvernZetasizerNanoZSP:动态光散射法测定酶聚合状态
5.EppendorfBioSpectrometerkinetic:实时动力学曲线记录系统
6.MettlerToledoT90自动滴定仪:碘量法标定H₂O₂浓度
7.BeckmanCoulterOptimaXPN-80超速离心机:亚细胞组分分离(15,000g)
8.BioTekSynergyH1多功能酶标仪:96孔板高通量活性筛查
9.Metrohm905Titrando系统:电化学法氧释放量监测
10.ShimadzuLCMS-8060三重四极杆质谱:酶修饰位点鉴定