检测项目
1.成虫形态特征鉴定:体长1.8-2.3mm,鞘翅刻点排列密度≥15列/mm
2.分子生物学检测:线粒体COI基因序列比对(658bp片段),ITS2区段扩增特异性分析
3.卵形态学检验:卵粒直径0.350.02mm,表面纵脊数量8-10条
4.幼虫发育阶段判定:头壳宽度分级(Ⅰ龄≤0.15mm至Ⅳ龄≥0.35mm)
5.寄主植物残留物DNA检测:芸薹属特异性引物BrassF/BrassR扩增验证
检测范围
1.十字花科蔬菜进出口植株(甘蓝、花椰菜、芥菜等)
2.油料作物种子(油菜籽、芥菜籽)及其加工制品
3.植物检疫处理后的仓储包装材料(木质托盘、纸箱)
4.土壤及栽培基质样本(粒径≤2mm组分)
5.昆虫标本馆藏标本的种质资源复核
检测方法
1.ISO21571:2005分子生物学检测规范(DNA提取与PCR扩增)
2.GB/T18085-2008植物检疫中跳甲类害虫实验室鉴定规程
3.ASTME1752-17显微CT扫描昆虫三维结构重建标准
4.SN/T1355-2017进出境植物及其产品中跳甲检疫鉴定方法
5.ISO/IEC17025:2017实验室管理体系对显微测量设备的校准要求
检测设备
1.HitachiSU3500扫描电子显微镜(表面微结构观测@5kV加速电压)
2.LeicaDM750偏光显微镜(体视测量精度0.01mm)
3.Bio-RadT100ThermalCyclerPCR仪(梯度温控0.1℃)
4.ThermoScientificNanoDropOne超微量分光光度计(DNA纯度A260/A280≥1.8判定)
5.BrukerSkyscan1272显微CT系统(三维重建分辨率≤5μm)
6.OlympusBX53荧光显微镜(DAPI染色观察卵核分裂相)
7.MettlerToledoXS205电子天平(称量精度0.01mg)
8.Agilent4200TapeStation系统(DNA片段完整性评估)
9.ZeissAxioZoom.V16宏观变焦显微镜(整体形态学记录)
10.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机(最大转速15,300g)