检测项目
1.染色体数目异常:非整倍体细胞比例≥5%判定为阳性(分辨率0.1%)
2.染色体结构畸变:包括断裂(≥3处/细胞)、环状染色体(直径≤2μm)及双着丝粒体(发生率≥0.5%)
3.纺锤体组装检查:异常纺锤体形成率≥10%(误差0.5%)
4.细胞周期阻滞分析:G2/M期阻滞时长>48小时(时间分辨率15分钟)
5.微核发生率:微核数量/1000细胞≥15个(显微视野覆盖率≥95%)
检测范围
1.肿瘤组织切片(石蜡包埋/冰冻样本)
2.骨髓细胞样本(有核细胞浓度≥110^6/mL)
3.体外培养细胞系(传代次数≤20代)
4.生殖细胞样本(精母细胞/卵母细胞)
5.药物诱导模型细胞(暴露时间≥24小时)
检测方法
1.ISO19238:2014辐射生物剂量评估用染色体畸变分析
2.ASTME2520-15体外微核试验标准指南
3.GB/T12715-1991哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验
4.GB/T28646-2012化学品哺乳动物精原细胞染色体畸变试验
5.ISO21427-2:2006水质量-微核测定第2部分:细胞系法
检测设备
1.OlympusBX53荧光显微镜:配备DP80双摄像头系统(分辨率40803072)
2.ThermoFisherScientificSorvallST16离心机:最大转速16,000rpm(温度控制1℃)
3.LeicaCM1950冰冻切片机:切片厚度1-50μm(精度0.5μm)
4.BDFACSCantoII流式细胞仪:激光波长488nm/640nm(分析速度10,000细胞/秒)
5.NikonTi-E倒置显微镜:配备PerfectFocusSystem防漂移系统
6.AgilentBioTekCytation5成像微孔板检测系统:支持4通道荧光同步采集
7.ZeissAxioScan.Z1全自动玻片扫描仪:40倍物镜扫描速度15mm/s
8.MiltenyiBiotecGentleMACSOcto解离仪:程序化处理8个样本/批次
9.HamiltonSTARlet液体处理工作站:移液精度0.5μL(96通道)
10.RocheLightCycler480II实时PCR仪:温控精度0.1℃(384孔板)