检测项目
1.CGRP-α与CGRP-β异构体浓度测定(灵敏度0.1pg/mL)
2.血浆/血清中游离CGRP稳定性测试(-80℃保存时效验证)
3.CGRP受体结合活性分析(EC50值测定范围0.1-100nM)
4.CGRP前体蛋白裂解效率评估(HPLC纯度≥95%)
5.生物样本中CGRP降解产物鉴定(LC-MS/MS检出限0.05ng/mL)
检测范围
1.人体生物样本:血浆(EDTA抗凝)、血清、脑脊液
2.实验动物组织:大鼠三叉神经节、小鼠脊髓背根神经节
3.细胞培养上清液:原代神经元培养体系(DMEM/F12培养基)
4.重组蛋白制品:大肠杆菌表达系统生产的rhCGRP
5.医疗器械浸提液:神经刺激电极浸出液(ISO10993-12标准制备)
检测方法
1.ELISA法:依据ISO15189医学实验室标准建立双抗体夹心法(R&DSystemsQuantikine试剂盒)
2.放射免疫分析法:GB/T21981-2020《放射免疫分析试剂盒》规范操作流程
3.液相色谱-质谱联用法:ASTME2529-06《生物标志物定量分析方法验证》
4.实时荧光定量PCR:GB/T37875-2019《核酸定量测定要求》进行基因表达分析
5.WesternBlot法:参照GB/T34821-2017《蛋白质印迹法通则》执行
检测设备
1.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪(CGRPmRNA表达分析)
2.Agilent6495BTripleQuadrupoleLC/MS系统(CGRP代谢产物鉴定)
3.BioTekSynergyH1多功能酶标仪(ELISA法吸光度测定)
4.WatersACQUITYUPLCH-Class超高效液相色谱(肽段分离纯化)
5.PerkinElmerWizard2γ计数器(放射免疫分析数据采集)
6.EppendorfCentrifuge5430R低温离心机(生物样本前处理)
7.BeckmanCoulterAU5800全自动生化分析仪(干扰物质筛查)
8.MiltenyiBiotecGentleMACS组织解离器(神经组织样本制备)
9.SartoriusCubisII半微量天平(标准品精确称量)
10.LabconcoFreeZone冻干机(样品长期保存处理)