检测项目
1.分离培养:采用麦康凯琼脂(MAC)和伊红美蓝琼脂(EMB),37℃需氧培养18-24小时
2.革兰氏染色:观察革兰阴性短杆菌形态(0.4-0.71.0-3.0μm)及单鞭毛结构
3.生化反应:IMViC试验(++--型),β-半乳糖苷酶(ONPG阳性),尿素酶阴性
4.药敏试验:CLSIM100标准测试头孢噻肟(MIC≤1μg/mL)、环丙沙星(MIC≤0.25μg/mL)等20种抗生素
5.分子鉴定:16SrRNA基因测序(V3-V4区扩增),毒力基因stx1/stx2/eae的PCR检测
检测范围
1.食品类:生鲜肉类(鸡肉/牛肉)、乳制品(巴氏杀菌乳/奶酪)、即食蔬菜
2.饮用水:市政供水末梢水、瓶装矿泉水、直饮水系统出水
3.临床样本:尿液(≥10^5CFU/mL)、血液培养液、伤口分泌物
4.药品类:非无菌原料药(胰酶制剂)、中药提取物
5.环境样本:污水处理厂出水(滤膜法采集)、动物养殖场垫料
检测方法
ISO16654:2001《食品中大肠埃希菌O157检测》免疫磁珠分离法
GB4789.38-2012《食品安全国家标准大肠埃希氏菌计数》MPN法
CLSIEP07-A3《抗菌药物敏感性试验执行标准》微量肉汤稀释法
ASTMD6503-19《水样中大肠杆菌测试方法》酶底物法(Colilert试剂)
GB/T5750.12-2023《生活饮用水标准检验方法》滤膜培养法(EC培养基)
检测设备
1.恒温培养箱(SPX-250B-Z):温度控制0.5℃,双屏数字显示
2.VITEK2Compact全自动微生物鉴定系统:配套GN卡可检测49种生化反应
3.Bio-RadT100PCR仪:支持梯度PCR(温度精度0.1℃)
4.ThermoScientificMultiskanFC酶标仪:450nm/630nm双波长读取OD值
5.OlympusCX43生物显微镜:1000油镜观察细菌形态
6.Sartorius微生物限度检测系统(16750型):含0.45μm孔径滤膜
7.BDPhoenixM50药敏分析仪:可同时测试45种抗菌药物
8.IlluminaMiSeq测序平台:2300bp双端测序用于全基因组分析
9.MemmertINCOmed细胞培养箱:CO₂浓度控制范围0-20%
10.MaldiBiotyper质谱系统:基于核糖体蛋白指纹图谱快速鉴定菌种