检测项目

1.血清铜蓝蛋白测定：采用免疫比浊法检测，正常参考值20-60mg/dL，患者常低于20mg/dL

2.血浆游离铜浓度分析：原子吸收光谱法测定，正常范围70-140μg/dL，患者多低于50μg/dL

3.ATP7A基因全外显子测序：覆盖34个外显子区域及剪接位点变异筛查

4.皮肤成纤维细胞铜蓄积试验：培养细胞铜含量测定（正常＜250ng/mg蛋白）

5.毛发显微结构分析：偏振光显微镜观察毛发扭曲/断裂特征

6.尿儿茶酚胺代谢物检测：HPLC法测定DOPA/DHPG比值异常

检测范围

1.新生儿筛查样本（干血片/滤纸血斑）

2.外周血全血DNA样本

3.脑脊液铜含量测定样本

4.皮肤活检组织（成纤维细胞培养）

5.毛发样本（枕部/肢体近端毛发优先）

6.胎盘组织（产前诊断样本）

检测方法

1.ICP-MS法（ISO17294-2:2016）用于微量铜元素定量分析

2.Sanger测序（GB/T30988-2014）验证ATP7A基因点突变

3.MLPA技术（ISO15189:2012）检测大片段缺失/重复变异

4.Westernblot（GB/T27403-2008）验证铜蓝蛋白表达水平

5.TEM电镜观察（ASTME3060-16）分析细胞超微结构改变

6.LC-MS/MS（GB/T37847-2019）测定尿有机酸谱异常

检测设备

1.ThermoFisheriCAPRQICP-MS：痕量金属元素定量（检出限0.1μg/L）

2.IlluminaNextSeq550Dx：NGS平台完成全外显子组测序

3.Agilent1260InfinityIIHPLC：儿茶酚胺代谢物分离分析

4.Hitachi7100全自动生化分析仪：铜蓝蛋白免疫比浊法测定

5.ZeissAxioImagerM2显微镜：毛发形态学数字化分析系统

6.PerkinElmerPinAAcle900T原子吸收光谱仪：血清/脑脊液铜浓度测定

7.AppliedBiosystems3500xL基因分析仪：Sanger测序验证变异位点

8.JEOLJEM-1400Flash透射电镜：亚细胞结构观察（80kV加速电压）

9.Bio-RadChemiDocMP成像系统：Westernblot蛋白表达定量分析

10.EppendorfMastercyclerX50PCR仪：MLPA反应体系扩增控制