检测项目
1.序列准确性验证:采用Sanger测序法进行全长比对,误差率≤0.1%
2.HPLC纯度检测:C18反相色谱柱分析,主峰纯度≥95%
3.熔解温度(Tm值)测定:紫外分光光度法测量260nm吸光度变化
4.荧光标记效率:MALDI-TOF质谱定量分析Cy3/Cy5标记率≥90%
5.核酸酶耐受性测试:DNaseI酶解实验评估60min残留率>80%
检测范围
1.基因芯片用DNA探针:长度15-60mer修饰探针
2.FISH荧光原位杂交探针:染色体定位特异性探针
3.qPCR分子信标探针:TaqMan/MGB双标记探针
4.CRISPR引导RNA复合体:sgRNA-DNA复合探针
5.核酸适配体筛选库:随机序列ssDNA/RNA文库
检测方法
1.ISO20395:2019生物技术-核酸定量方法
2.ASTME2148-16核酸杂交试验标准指南
3.GB/T34796-2017核酸纯度检测紫外分光光度法
4.GB/T37873-2019生物样品中核酸浓度测定通则
5.ISO/IEC17025:2017检测实验室通用要求
检测设备
1.Agilent2100Bioanalyzer:芯片电泳系统(DNA1000芯片)
2.ThermoNanoDropOne:微量核酸浓度测定(1μL检出)
3.WatersACQUITYUPLCH-Class:超高效液相色谱系统
4.AppliedBiosystemsSeqStudio:毛细管电泳测序仪
5.RocheLightCycler480II:实时荧光定量PCR仪
6.MalvernZetasizerNanoZS:动态光散射粒径仪
7.EppendorfBioSpectrometer:全波长分光光度计
8.BrukerAutoflexSpeedMALDI-TOF:质谱分析系统
9.BeckmanCoulterDTX880:多功能酶标仪
10.Bio-RadCFXOpus96:实时定量PCR系统