检测项目
1.病毒外壳蛋白基因序列分析(CP基因全长约800bp)
2.RNA基因组含量测定(阈值≥10^3copies/μL)
3.血清学反应滴度检测(ELISA效价≥1:1024)
4.病毒粒子形态观测(杆状颗粒长度280-300nm)
5.寄主植物接种试验(系统侵染率≤95%)
6.病毒稳定性测试(热灭活温度55℃1℃)
检测范围
1.赤豆属种子及种苗(Phaseolusangularis)
2.田间发病植株叶片样本(采集期≤72小时)
3.耕作层土壤残留物(深度0-20cm)
4.蚜虫媒介个体(Myzuspersicae等)
5.豆科加工产品(含水量≤14%)
6.组培苗脱毒材料(继代代数≤5代)
检测方法
ISO16140-6:2019《分子生物学检测规程》
GB/T28057-2021《植物病毒ELISA检测技术规范》
ASTME3066-16《电子显微镜病毒鉴定标准》
NY/T673-2003《豆类种子病毒检疫规程》
SN/T2127-2015《进出境种苗病毒实时荧光PCR方法》
检测设备
Bio-RadCFX96实时荧光定量PCR仪(灵敏度0.1fg/μL)
ThermoMultiskanFC酶标仪(波长范围400-750nm)
JEOLJEM-1400Flash透射电镜(分辨率0.38nm)
EppendorfCentrifuge5430R高速离心机(max30,000g)
QiagenRNeasyPlantMiniKit核酸提取系统(纯度A260/A280≥1.8)
LeicaCM1950冷冻切片机(切片厚度5-50μm可调)
SartoriusCP225D精密天平(精度0.01mg)
MemmertIPP110培养箱(控温精度0.3℃)