检测项目
1.形态学鉴定:体长4.5-6.2mm;触角芒裸状;中胸背板具3条黑色纵纹;腹部第2-4节背板具梯形黑斑
2.分子生物学检测:COI基因序列比对(658bp区段);ITS1/ITS2核糖体RNA扩增
3.寄生率测定:宿主虫瘿解剖检出率≥95%;幼虫体长分级(L1:0.8-1.2mm/L3:3.5-4.8mm)
4.卵形态分析:卵长0.35-0.42mm;表面纵脊数12-14条;孵化周期(25℃/724h)
5.抗药性监测:有机磷类LC50值测定;羧酸酯酶活性(ΔOD412/min/mg蛋白)
检测范围
1.松科植物针叶及枝干样本(松树、云杉等)
2.仓储松木制品(板材、木托盘等)
3.农林产品进出口检疫包装材料
4.土壤及枯落物中的蛹态个体
5.寄生性天敌昆虫携带体筛查
检测方法
ISO21571:2013分子生物学核酸提取与扩增规范
GB/T18085-2022植物检疫林木蛀干害虫检测规程
ASTME1752-17昆虫抗药性生物测定标准指南
SN/T2033-2017进出境木质包装中双翅目害虫检疫鉴定方法
GB/T35338-2017昆虫标本制作与保存技术规范
检测设备
OlympusBX53研究级显微镜(1000油镜观察刚毛排列)
Bio-RadT100ThermalCyclerPCR仪(COI基因扩增)
Agilent4200TapeStation系统(DNA片段分析)
LeicaEMCPD300临界点干燥仪(卵表面超微结构观察)
ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪(抗性酶活性测定)
RetschGM200研磨仪(昆虫组织破碎)
MemmertIPP110培养箱(恒温孵化实验)
CarlZeissStemi508体视镜(幼虫形态观测)
OhausPioneerPA214C分析天平(0.1mg精度称量)
EppendorfCentrifuge5430R冷冻离心机(核酸分离纯化)