检测项目
1.菌种鉴定:包括革兰氏染色特性(G-短杆菌)、氧化酶试验(阴性)、TSI反应(产酸/产气)
2.血清凝集试验:Vi抗原效价≥1:80,O抗原效价≥1:160
3.药敏试验:测试氨苄西林(MIC≤8μg/mL)、环丙沙星(MIC≤0.06μg/mL)等12种抗生素
4.生化反应:葡萄糖发酵(产酸不产气)、赖氨酸脱羧酶(阳性)、H₂S生成(阳性)
5.分子生物学检测:invA基因(引物序列5'-GTGAAATTATCGCCACGTTCGGGCAA-3')
检测范围
1.临床样本:血液/骨髓培养液(增菌时间≥72h)、粪便标本(选择性培养基分离)
2.食品样本:生鲜肉类(25g样品+225mL缓冲蛋白胨水)
3.环境样本:污水(滤膜法浓缩处理)
4.诊断菌液:Vi多糖抗原溶液(浓度0.9mg/mL0.1)
5.疫苗质控:灭活疫苗原液(甲醛残留≤0.02g/L)
检测方法
ISO6579:2017食品链微生物学-沙门氏菌检测水平方法
GB4789.4-2016食品安全国家标准沙门氏菌检验
WS/T13-1996临床诊断中伤寒、副伤寒血清学诊断方法
CLSIM100-ED33抗菌药物敏感性试验执行标准
ASTME2149-2013a固定条件下抗菌剂动态接触试验方法
检测设备
1.VITEK2Compact全自动微生物鉴定系统(生物梅里埃):30孔试剂卡完成GN/GP鉴定
2.BDBACTECFX40血培养仪:实时监测CO₂浓度变化(阈值≥30mmHg)
3.ThermoScientificMultiskanFC酶标仪:波长450nm/630nm双通道读取OD值
4.EppendorfMastercyclerX50PCR仪:升降温速率6℃/s(30循环标准程序)
5.OlympusCX43生物显微镜:100油镜观察鞭毛染色标本
6.SartoriusQuintix电子天平(精度0.1mg):称量范围82g~220g
7.MemmertINCOmed培养箱:温度控制0.3℃(351℃恒温培养)
8.ThermoScientificHeracellVIOS160iCO₂培养箱:5%CO₂浓度维持系统