检测项目

1.病原分离培养：需监测菌落形态（直径0.5-1mm透明菌落）、溶血特性（β型溶血）、生化反应（NAD依赖型生长）

2.PCR核酸检测：靶向16SrRNA基因（引物HPS-1/HPS-2），扩增产物483bp

3.血清分型检测：覆盖15种血清型（HPS1-15），采用玻片凝集法判定

4.药敏试验：测试β-内酰胺类/氟喹诺酮类等8类抗生素的MIC值

5.病理组织学检查：观察纤维素性胸膜炎/关节炎特征病变

检测范围

1.临床样本：肺脏/关节液/脑脊液等病变组织

2.血液样本：EDTA抗凝血（采集量≥2mL）

3.环境样本：养殖场水样/饲料/垫料

4.疫苗效力评价：灭活疫苗抗原含量≥10^8CFU/mL

5.抗生素残留：恩诺沙星/头孢噻呋等药物残留量≤50μg/kg

检测方法

1.ISO10272-1:2017《食品链微生物学-水平法》细菌分离培养

2.GB/T14926.50-2001《实验动物微生物学检验方法》PCR扩增规范

3.ASTMF2315-18《兽医诊断试剂盒性能验证标准》

4.NY/T541-2020《动物疫病诊断技术规程》病理切片制备

5.GB31650-2019《食品安全国家标准》抗生素残留测定

检测设备

1.Bio-RadCFX96实时荧光定量PCR仪：温度精度0.1℃，支持多重荧光通道

2.ThermoScientificForma311CO2培养箱：温度范围4-50℃，CO2浓度控制0.1%

3.VITEK2Compact全自动微生物鉴定系统：可鉴定420种革兰氏阴性菌

4.ThermoFisherMultiskanFC酶标仪：波长范围340-850nm，OD值分辨率0.001

5.OlympusBX53荧光显微镜：配备DP80双摄像头成像系统

6.SartoriusCP225D电子天平：称量精度0.01mg/220g

7.EppendorfCentrifuge5430R：最大转速15,300rpm，温控范围-20-40℃

8.MilestoneETHOSEZ微波消解仪：40位转子，温度控制1℃

9.WatersACQUITYUPLCH-Class超高效液相色谱：压力范围0-18,000psi

10.LeicaRM2235轮转式切片机：切片厚度1-60μm可调